DM 疾病标记 1875 - 8630 0278 - 0240 Hindawi 10.1155 / 2020/6289063 6289063 研究文章 SEPT9为肝细胞癌作为非侵入性标记基因甲基化 https://orcid.org/0000 - 0003 - 1415 - 7597 李 Baoliang 1 2 黄 郝 3 https://orcid.org/0000 - 0002 - 2431 - 6435 黄 Ronghai 2 张 魏 2 周 Guangpeng 3 https://orcid.org/0000 - 0002 - 8870 - 500 x 吴 郑ydF4y2Ba 3 Lv Chunhua 3 https://orcid.org/0000 - 0002 - 3043 - 6353 汉 Xiaoliang 3 https://orcid.org/0000 - 0002 - 3132 - 584 x 江 李 2 李 Yongjun 3 https://orcid.org/0000 - 0001 - 9008 - 0590 李 宝华 4 https://orcid.org/0000 - 0002 - 3156 - 7822 张 Zhongtao 1 Foddis 鲁迪 1 普通外科学系 北京友谊医院 首都医科大学 北京肿瘤浸润和转移研究的重点实验室和国家临床研究中心100050年北京消化疾病 中国 bfh.com.cn 2 普通外科学系 北京地坛医院 首都医科大学 北京100015年 中国 ccmu.edu.cn 3 BioChain(北京)科技有限公司 北京102600年 中国 biochain.com 4 呼吸医学系 北京门头沟区医院 北京100230年 中国 ccmu.edu.cn 2020年 30. 10 2020年 2020年 5 8 2019年 15 5 2020年 30. 6 2020年 30. 10 2020年 2020年 版权©2020李Baoliang et al。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

背景。早期发现似乎是最有效的方法来改善整个肝细胞癌(HCC)患者的生存。我们评估了等离子体的潜在性能 SEPT9甲基化(mSEPT9)的无创性诊断生物标记的肝癌患者。 方法。共有373名受试者中,该组织由104名肝癌患者,95年与一个有危险的疾病,和174名健康对照组(HC)。的甲基化mSEPT9决心使用methylation-specific荧光定量PCR。等离子体的诊断效能评价肝癌mSEPT9的单盲方式。 结果。接受者操作特征(ROC)曲线表明,等离子体mSEPT9可以用来检测和区分肝癌ROC曲线下面积(AUROC) 0.961,敏感性82.7%,特异性96.0%来自HC。这些结果表明,等离子体mSEPT9诊断性能优于血清α胎蛋白(法新社)(AUROC 0.881,敏感性57.7%,特异性98.3%)。类似的研究结果指出在早期HCC的检测。当结合血清AFP,检测的灵敏度增加到91.3%和87.7%的肝细胞癌和早期肝癌,分别。值得注意的是,等离子体的水平mSEPT9手术后显著下降( P = 0.001 )。 结论。等离子体 SEPT9甲基化可能会成为一个有用的和HCC的无创性诊断生物标记,可以用来评估肝细胞癌治疗的治疗效果。

 首都医科大学 201601年 1。介绍

肝癌是目前第六最常见的恶性疾病和癌症死亡的第四大原因全世界每年大约有841000新发病例和782000例死亡( 1]。在中国,肝癌的发病率和死亡率排名第四和第二,分别在新诊断癌症病例和癌症死亡,占全世界大约一半的新病例和死亡( 2]。肝细胞癌(HCC)是最常见的肝癌,肝硬化密切相关,慢性感染乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)和代谢和酒精性肝病 3]。尽管改善这种癌症的诊断和治疗,预后和生存仍很差,5年生存率不到30%。率主要是由于它被诊断出晚期,错过的机会获得最佳治疗肝癌患者( 4]。早期检测和收据的治疗治疗似乎是最有效的方法来改善肝癌患者的总生存期( 5]。

目前,血清α胎蛋白(法新社)测定和超声(美国)是主要的方法用于检测和诊断肝细胞癌( 6]。不过,法新社一直质疑由于其低灵敏度(25 - 65%)常用的截止值20毫微克/毫升( 7]。此外,美国早期HCC敏感性出现类似于血清AFP和很大程度上依赖于肝硬化的存在,肿瘤的大小和设备和检查知识。因此,血清AFP和美国不满意肝癌的早期诊断方法,和新的迫切需要有效的生物标志物。

最近报道,肝细胞癌的特征是多种遗传和表观遗传变化( 8]。与基因改造,表观遗传修饰不改变DNA序列,但他们改变DNA构象和表达,在肿瘤发生和发展中起着重要作用[ 9]。DNA甲基化是表观遗传修饰和早期癌症事件能被探测到的plasma-derived游离DNA,使它的理想和有用的生物标志物早期诊断和癌症的分期 10]。许多研究表明,DNA甲基化分析特定基因,如 p16, p15, RASSF1A基因, APC, SOCS1可以申请HCC患者的早期发现和诊断( 10, 11]。然而,到目前为止,没有批准循环后生生物标志物来诊断HCC在个体水平。

的 septin9基因( SEPT9)甲基化测试是第一个blood-based甲基化测试通过美国食品和药物管理局(FDA)作为结直肠癌筛选试验( 12]。以前的工作建议 SEPT9扮演一个关键的角色在细胞分裂和候选肿瘤抑制基因的甲基化与致癌作用[ 13, 14]。 SEPT9表达式是通过异常的启动子甲基化在肝癌经常沉默,这是一个重大epidriver基因在肝脏致癌作用( 15]。最近,据报道,在肝硬化患者中, SEPT9甲基化(mSEPT9)测试构成了一个有前途的循环HCC诊断后生生物标志物在个别病人级别( 16]。鉴于在中国人群肝癌的根本原因是不同于那些在欧洲,本研究旨在探讨是否 SEPT9甲基化可以在肝癌病人的血浆中发现中国人口和随后被用作非侵入性肝细胞癌的标志检测。

 2。材料和方法 2.1。研究设计和病人的选择

在这项研究中,患者症状和体征的肝脏恶性肿瘤,包括104个肝细胞癌(HCC)患者,95年与高危肝病(肝硬化、肝炎和焦结节性增生),和174名健康对照组(HC)曾被视为健康从北京地坛医院接受体检后首都医科大学,从2018年7月到2019年1月入学。所有的参与者提供等离子体样品,mSEPT蒙蔽的方式测量水平。最后的诊断结果是基于至少两个成像方法(超声、CT和MRI)和组织病理学确认。肿瘤患者共存、转移癌或未定义的病理状态被排除在外。血浆样品也收集了来自15个肝癌患者和肿瘤切除术后10天前评估等离子mSEPT9的手术后的预后价值。所有的研究对象,包括199名患者和174名健康对照,接受了法新社同步检测。本研究AFP的正常范围是确定0-20 ng / mL,和值大于20被认为是异常。本研究通过北京地坛医院首都医科大学伦理委员会,所有受试者知情同意。

 2.2。样本收集和存储

标准操作协议和血液集合进行如前所述[ 17]。10毫升静脉血样本收集从每个主题使用K2EDTA抗凝管(美国BD生物科学)。等离子体是孤立的血液采集后4小时内使用离心室温(1350克,12分钟)。血浆样本再次离心机(1350克,12分钟)去除残留的血液细胞。样品的存储和运输的用户手册进行诊断工具包Septin9基因甲基化分析(BioChain(北京)科技有限公司,北京,公关中国)。如前所述(样本质量评估 18]。

 2.3。量化Methylation-Specific PCR qMSP SEPT9化验

亚硫酸氢DNA提取和转换后进行手动诊断设备制造商的指示 Septin9基因甲基化分析(BioChain(北京)科技有限公司,北京,中国公关)。甲基化目标序列bisulfite-treated DNA模板放大使用实时PCR ABI7500 PCR设备(技术)。PCR进行在一个60 μL PCR 25 μL的模板DNA,通过反应系统运行。这个过程由最初的30分钟的激活在94°C,紧随其后的是45周期在62°C 5秒,55.5°C 35秒,93°C, 30秒,然后在40°C冷却5秒。在定量methylation-specific PCR, β肌动蛋白( ACTB)是作为内部控制评估的数量输入DNA, PCR扩增的有效性。每一批样品确定的有效性的基础上甲基化 SEPT9和 ACTB循环阈值(CT)值的积极的和消极的控制。工具包提供的积极的和消极的控制和并行运行每一次样品。检测阈值和反应因素进行检查和优化使用临床血浆样本。

 2.4。统计分析

使用SPSS 20.0软件进行统计分析(、IBM公司,纽约Armonk)和图表是为Windows使用GraphPad Prism 5.0。等离子体的CT值差异SEPT9甲基化分析使用学生的不同群体之间进行了分析 t 测试。等离子体之间的协会mSEPT9 HCC患者及其临床病理的状态参数进行了分析使用费舍尔的测试。评估的诊断性能 SEPT9基因甲基化之间的单独或结合法新社肝癌或早期HCC和HC或高危疾病,使用逻辑回归模型进行评估。在此之后,新的变量预测概率( P )受到接受者操作特征曲线(ROC)分析。中华民国曲线下面积来计算相应的生成(auc) 95%可信区间(CI),敏感性,特异性,阳性预测值(PPV),阴性预测值(NPV),和准确性SEPT9基因的甲基化单独或结合法新社HCC诊断的截止值决定的。肝癌患者的疗效评价的差异使用成对的评估 t 测试。小动物——一张长有的概率 P < 0.05 被认为是具有统计学意义。

 3所示。结果 3.1。DNA甲基化状态的SEPT9等离子体在不同的群体

的 SEPT9启动子甲基化在等离子体(mSEPT9)地位从104年肝癌患者,95例高危疾病,和174名健康对照组(HC)化验。参与者的基线特征如表所示 1。自基线特征没有使用大多数正常对照组的试验检测,循环阈值(CT)值被设定为45 (PCR试验周期)的最大数量为那些没有检测到样品。mSEPT9在肝细胞癌患者的CT值明显低于高碳钢(HCC与高碳钢, P < 0.0001 )和高危疾病患者(HCC与危险, P < 0.0001 ),这表明高浓度的mSEPT9在肝细胞癌患者的血浆(图 1和表 S1)。我们也分析了相同的数据与Wilcoxon-Mann-Whitney测试,得到了同样的结论(图 S1)。

参与者的基线特征。

肝细胞癌(%) 高危(%) HC (%) 统计数据 χ 2 P 价值
NgydF4y2Ba 104年 95年 174年
性别
男性 83 (79.8) 56 (58.9) 100 (57.5) 15.562 < 0.001
女 21日(20.2) 39 (41.1) 74 (42.5)
年龄
0-50 33 (31.7) 36 (37.9) 83 (47.7) 7.307 0.026
> 50 71 (68.3) 59 (62.1) 91 (52.3)
肝硬化
是的 80 (76.9) 63 (66.3) NA 2.762 0.097
没有 24 (23.1) 32 (33.7) NA
病因
乙型肝炎病毒 89 (85.6) 59 (62.1) NA 23.353 < 0.001
丙肝病毒 10 (9.6) 7 (7.4) NA
含酒精的 2 (1.9) 8 (8.4) NA
其他人 3 (2.9) 21日(22.1) NA
法新社
0-20 ng / mL 44 (42.3) 82 (86.3) 171 (98.3) 129.220 < 0.001
> 20 ng / mL 60 (57.7) 13 (13.7) 3 (1.7)
BCLC阶段
一个 46 (44.2)
B 27日(26.0)
C / D 23日(22.1)
未知的 8 (7.7)

肝细胞癌显示肝细胞癌。HC表明健康控制。高危表明良性肝脏疾病,包括肝硬化和肝炎。乙肝病毒表明乙肝病毒、丙肝病毒表明丙型肝炎病毒,法新社表示α胎蛋白,BCLC阶段表明巴塞罗那临床肝癌。

等离子体SEPT9游离DNA甲基化(mSEPT9)水平的等离子体化验使用methylation-specific荧光定量PCR。定量PCR显示显著降低平均CT值SEPT9甲基化的检测在肝细胞癌(HCC, n = 104年 )相比,健康控制(HC, n = 174年 )和高危疾病( n = 95年 )。高危疾病类别显示良性肝脏疾病,包括肝硬化和肝炎。CT显示循环阈值。Early-HCC代表患者早期肝细胞癌(A和B阶段)。Late-HCC代表患者晚期肝癌(阶段C和D)。完整的线显示每组的平均CT。

 3.2。等离子体的诊断价值mSEPT9肝癌患者,早期肝癌

实现观察测试性能,ROC曲线分析被用来评估曲线下的面积(AUC)、敏感性、特异性和确定最佳截止CT mSEPT9 HCC诊断的价值。与HC相比,AUC估计为0.961 (95% CI 0.933 - -0.989),和mSEPT9敏感性为82.7%(86/104),特异性为96.0%(167/174)的CT截止值41。此外,阳性预测值(PPV),阴性预测值(NPV),和准确性分别为92.5%,90.3%,和91.0%,分别为(图 2(一个)和表 2)。类似的结果从一个比较肝细胞癌患者和那些高危疾病。AUC估计为0.843 (95% CI 0.787 - -0.899),和mSEPT9敏感性为82.7%(86/104),特异性为83.2%(79/95)的CT截止值41。此外,PPV、NPV和准确性分别为84.3%,81.4%,和82.9%,分别为(图 2 (c)和表 2)。

接受者操作特征曲线(ROC)等离子体SEPT9甲基化(mSEPT9)和血清α胎蛋白(法新社)在肝细胞癌的诊断和早期HCC健康对照组和高危疾病组。ROC曲线的等离子mSEPT9单独和不包含法新社AFP对肝癌患者和HC (a),早期肝癌患者和HC (b),肝细胞癌患者和高危疾病(c)和早期肝癌患者和高危疾病(d)。肝细胞癌显示肝细胞癌。HC表明健康控制。高危表明非癌变肝脏疾病包括肝硬化和肝炎。

表演的等离子体SEPT9甲基化(mSEPT9)和血清AFP的诊断肝细胞癌(HCC)或早期肝癌。

截止值 AUC 灵敏度(%) 特异性(%) PPV(%) 净现值(%) 精度(%)
价值 95%可信区间
肝细胞癌与HC
mSEPT9 CT < 41 0.961 0.933 - -0.989 82.7 96.0 92.5 90.3 91.0
法新社 > 20 ng / mL 0.881 0.833 - -0.928 57.7 98.3 95.2 79.5 83.1
SEPT9 +法新社 0.986 0.974 - -0.999 91.3 94.8 91.3 94.8 93.5
早期肝癌与HC
mSEPT9 CT < 41 0.946 0.907 - -0.985 76.7 96.0 88.9 90.8 90.3
法新社 > 20 ng / mL 0.852 0.789 - -0.914 52.1 98.3 92.7 83.0 84.6
SEPT9 +法新社 0.980 0.962 - -0.999 87.7 94.8 87.7 94.8 92.7
肝细胞癌与危险
mSEPT9 CT < 41 0.843 0.787 - -0.899 82.7 83.2 84.3 81.4 82.9
法新社 > 20 ng / mL 0.812 0.751 - -0.873 57.7 86.3 82.2 65.1 71.4
SEPT9 +法新社 0.863 0.812 - -0.914 91.3 76.8 81.2 89.0 84.4
早期肝癌与危险
mSEPT9 CT < 41 0.799 0.73 - -0.868 76.7 83.2 77.8 82.3 80.4
法新社 > 20 ng / mL 0.779 0.707 - -0.852 52.1 86.3 74.5 70.1 71.4
SEPT9 +法新社 0.817 0.753 - -0.881 87.7 76.8 74.4 89.0 81.5

肝细胞癌显示肝细胞癌。HC表明健康控制。早期肝癌代表早期肝癌患者。高危表明良性肝脏疾病,包括肝硬化和肝炎。法新社指出α胎蛋白。CT显示循环阈值。AUC代表曲线下的面积。CI表示置信区间。PPV表明阳性预测值。NPV意味着消极的预测价值。

等离子体的CT值mSEPT9晚期肝癌患者(阶段C / D)显著降低比早期肝癌患者(A / B阶段)( P < 0.001 ,图 1),这表明等离子体mSEPT9积极与肝癌恶性肿瘤有关。ROC曲线表明,等离子体mSEPT9表现出卓越的性能在早期HCC患者的诊断和HC参与者(AUC 0.946, 95%可信区间0.907 - -0.985,敏感性76.7%,特异性96.0%),和高危疾病(AUC 0.799, 95%可信区间0.730 - -0.868,敏感性76.7%,特异性83.2%)(数据 2 (b)和 2 (d)和表 2)。这些结果表明,等离子体mSEPT9可以作为一个优秀的生物标志物早期肝癌的肝细胞癌的诊断和检测在临床的设置。

 3.3。相结合的诊断价值血清AFP浓度和血浆mSEPT9肝癌患者,早期肝癌

血清AFP是最接受和生物标志物用于肝癌检测和诊断。在这项研究中,等离子体mSEPT9的鉴别诊断表现,法新社,他们的组合进行评估。表明血清AFP的使用(AUC 0.881, 95%可信区间0.833 - -0.928,敏感性57.7%,特异性98.3%),等离子体mSEPT9 (AUC 0.961, 95%可信区间0.933 - -0.989,敏感性82.7%,特异性96.0%),或它们的组合(AUC 0.986, 95%可信区间0.974 - -0.999,敏感性91.3%,特异性94.8%)显著提高肝癌的诊断能力在健康个体(图 2(一个)和表 2)。诊断HCC与那些高危疾病还显示,等离子mSEPT9和组合比单独法新社(图更敏感 2 (c)和表 2)。

类似的结果也获得早期患者使用对比,HC控制,和那些有高危疾病。的截止20 ng / mL,法新社的AUC(0.852, 95%可信区间0.789 - -0.914)的敏感性52.1%,特异性98.3%,早期肝癌与HC区分开来。结合等离子体与血清AFP mSEPT9改善AUC (0.980, 95% CI 0.962 - -0.999)和敏感性(87.7%)和减少减少诊断特异性(94.8%)(图 2 (b)和表 2)。诊断早期HCC与那些高危疾病之间还显示,等离子mSEPT9和组合比单独法新社(图更敏感 2 (d)和表 2)。

等离子体mSEPT9的阳性检出率和血清AFP对控制和每个HCC阶段提出了直方图如图 3。有一个趋势,等离子体mSEPT9化验检测比早期肝癌晚期肝癌病例情况下(图 3)。结合等离子体mSEPT9测试的试验和血清AFP增强肝癌检测的测试灵敏度。这些结果表明,等离子体mSEPT9试验表现出高灵敏度的机会性筛查肝癌在每个阶段。当考虑法新社状态,发现积极的利率mSEPT9 AFP-negative诊断和AFP-positive HCC患者相比(79.5%比85.0%, P = 0.468 )(图 4),这表明mSEPT9在肝癌的诊断情况下无论法新社地位。这些结果表明,等离子体mSEPT9可以补充AFP-negative HCC的诊断和AFP-limited HCC患者显著识别性能。

等离子体的阳性检出率SEPT9甲基化(mSEPT9)和血清AFP的控制和在肝细胞癌的所有阶段。HC表明健康控制。高危表明非癌变肝脏疾病包括肝硬化和肝炎。HCC显示肝细胞癌(模拟),和未知的表明HCC阶段根据巴塞罗那临床肝癌(BCLC)阶段系统。法新社意味着α胎蛋白。

mSEPT9积极率、血清AFP或法新社在HCC的组合。积极在AFP-negative mSEPT9诊断和AFP-positive HCC患者相比(79.5%比85.0%, P = 0.468 ),这表明mSEPT9在肝癌的诊断无论法新社地位。肝细胞癌显示肝细胞癌。法新社意味着α胎蛋白。

 3.4。等离子体的相关性mSEPT9与肝细胞癌患者的临床病理特点

等离子体mSEPT9协会和肝细胞癌患者的临床病理的特点如表所示 S2。等离子体mSEPT9没有纠正性别、血清AFP水平,或e抗原状态。等离子体mSEPT9更频繁地观察到在老年患者(> 50)和晚期肝细胞癌比那些年轻的( P = 0.002 )和早期疾病( P = 0.03 )。

 3.5。等离子体mSEPT9可以监视治疗肝癌患者的疗效

动态变化的生物标志物反映病人的条件可以为医生提供临床指导。在这项研究中,等离子体mSEPT9水平(CT值)成对血浆样本中15例手术进行评估。等离子体的平均CT值mSEPT9手术前为37.9岁(范围:29.1 - -43.7)和42.2(范围:36.3 - -45.0)10天后( n = 15 , P = 0.001 )(图 5)。此外,等离子mSEPT9 CT值在所有13个阳性患者mSEPT9 (CT < 41)手术前大幅下降后10天。因此,在肝细胞癌患者的血浆mSEPT9水平动态变化可用于监测治疗的疗效。

mSEPT9水平(CT值)对肝癌病人之前和手术后10天。之前和之后表示手术前和手术后,分别。肝细胞癌显示肝细胞癌。CT意味着循环阈值。

 4所示。讨论

在肝癌的诊断,等离子体mSEPT9表现出非凡的敏感性和特异性检测在肝细胞癌患者中,即使在早期阶段从健康的个人和那些高危疾病。结合血清AFP、等离子体mSEPT9显示明显优越的敏感性比单独法新社在区分肝癌患者和控制。等离子体mSEPT9可以用来赞美AFP-negative HCC的诊断和AFP-limited HCC患者显著识别性能。此外,肝细胞癌患者的血浆mSEPT9水平动态变化可用于监测治疗的疗效。这些发现表明,等离子体mSEPT9可以作为非侵入性诊断为肝癌患者生物标志物。

DNA甲基化是致癌的一个重要事件,可以发现在plasma-derived游离DNA,这使得它的理想和有用的生物标志物早期诊断和分期的癌症。许多研究表明,DNA甲基化分析特定基因可用于癌症的早期诊断,如等离子体mSEPT9在结肠直肠癌 19),支气管肺泡灌洗液 SHOX2和 RASSF1A基因在肺癌, 20.),和尿液 问题在前列腺癌( 21]。然而,没有fda批准的循环后生生物标志物,已被证明是有用的诊断肝癌。

Septins是一种进化保守的家庭gtpase,在胞质分裂,产生了不同的职能,包括角色泡贩卖,细胞凋亡,细胞极性的维护 22]。 SEPT9septin家族的一员,作为一个肿瘤抑制基因在致癌作用和由异常的启动子甲基化沉默或减少,可重新激活通过与azacytidine治疗,提供的证据,这种基因的表观遗传机制在致癌作用[ 14, 23]。几个研究表明, SEPT9肿瘤抑制基因和行为起着重要的作用在调节细胞分裂的甲基化肝脏致癌作用[ 15, 24]。最近报道,等离子mSEPT9,小说循环dna游离表观遗传生物标志物,可以用来诊断HCC在个体病人与敏感性80.8%,特异性95.8% ( 16]。在欧洲,肝硬化和肝癌的病因主要是丙型肝炎和酒精性肝硬化,而在中国,重点主要是b型肝炎在这项研究中,等离子体的诊断性能mSEPT9在中国人口( 25)进行了研究。发现等离子体的诊断性能mSEPT9是依照先前的研究在欧洲。等离子mSEPT9表现出较高的诊断肝癌的性能,因此,它可以被认为是一种很有前途的生物标志物诊断肝癌患者在健康个体和高危疾病。

肝细胞癌是最常见的原发性肝癌诊断通常是在晚期由于缺乏有效的诊断的生物标志物。血清AFP是应用最广泛的生物标志物的诊断肝癌。然而,血清AFP水平缺乏足够的敏感性和特异性肝癌的早期诊断,有近三分之一的早期肝癌患者测试为阴性法新社( 7]。因此,法新社不满意的生物标志物早期诊断和预后评估。在这项研究中,等离子体mSEPT9的鉴别诊断表现,法新社,他们的组合进行评估。这是表明,与血清AFP相比,等离子体mSEPT9或肝细胞之间的结合显著提高诊断能力和健康之间的个人和肝细胞癌和高危疾病。等离子体mSEPT9补充AFP-negative HCC的诊断和AFP-limited HCC患者显著识别性能。此外,动态变化的HCC患者的血浆mSEPT9可以用来监测治疗效果。因此,可想而知,等离子体mSEPT9为肝癌患者是一种很有前途的非侵入性诊断的生物标志物。

等离子mSEPT9分析被证明是一个优秀的测试对肝癌检测在一项研究 16]。三个PCR反应和具体的应用探究mSEPT9最大化机会检测痕量的甲基化 SEPT9DNA。然而,在这项研究中,包是使用BioChain进行单管PCR与体积的两倍。这减少了数量的测试和污染的机会,降低了实验的成本。这种方法有利于病人在未来放映。这个简化mSEPT9分析减少测试过程的复杂性从三个PCR反应,有可能从中获益许多患者没有减少检测性能。因此,这是一个更简单、更廉价、更高效,方便HCC筛查的方法。

虽然等离子mSEPT9表现出良好的性能对肝癌检测患者在健康个体和高危疾病,它也与结肠直肠癌cross-specificity展出。然而,高危患者疾病,如肝硬化、更易患上肝癌比任何其他类型的癌症 26]。此外,积极的等离子mSEPT9率(4.1%)筛查人群和大肠癌的发病率很低,导致大大降低了阳性预测值(PPV)。因此,一个积极的等离子体mSEPT9测试一种高危疾病患者的肝脏应该为HCC最初唤起一个高水平的怀疑而不是结肠直肠癌。多中心、大规模队列研究的患者将有助于评估等离子体的诊断准确性mSEPT9测试筛选设置。

 5。结论

这项研究表明,等离子体mSEPT9可以是一个有前途的非侵入性和循环HCC诊断后生生物标志物在个体水平。此外,血浆mSEPT9和法新社的结合可以提高AFP独自在肝癌的诊断的敏感性。

 缩写 SEPT9:

Septin9

 肝细胞癌:

肝细胞癌

 HC:

健康的控制

 危险:

良性肝脏疾病,包括肝硬化和肝炎

 乙肝病毒:

乙型肝炎病毒

 丙肝病毒:

丙型肝炎病毒

 法新社:

α胎蛋白

 BCLC:

巴塞罗那临床肝癌

 CT:

循环阈值。

 数据可用性

使用的数据来支持本研究的发现可以从相应的作者。

 伦理批准

本研究通过北京地坛医院首都医科大学伦理委员会,所有受试者知情同意。

 的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

 确认

这项工作是支持的青年人才发展基金北京地坛医院,首都医科大学(201601)。作者没有其他相关关系或财务参与任何组织或实体与金融的兴趣或金融冲突与手稿中讨论的主题或材料除了这些披露。我们感谢LetPub ( http://www.letpub.com)的语言帮助在准备这个手稿。

 补充材料

图S1:等离子SEPT9甲基化(mSEPT9)水平进行了分析通过使用Wilcoxon-Mann-Whitney测试。据唐纳德的研究(1),当两个样本的标准差(SD)是不平等的, t 1型错误控制测试可能比非参数选择,比如Wilcoxon-Mann-Whitney测试。在这种情况下,这些组的标准差是不平等的,所以我们展示的结果 t 测试文本。表S1: methylation-specific荧光定量PCR分析等离子体 SEPT9(mSEPT9)。表S2: SEPT9启动子甲基化之间的相关性和肝细胞癌患者的临床病理参数。

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