IJPSgydF4y2Ba 国际高分子科学杂志》上gydF4y2Ba 1687 - 9430gydF4y2Ba 1687 - 9422gydF4y2Ba HindawigydF4y2Ba 10.1155 / 2020/2785304gydF4y2Ba 2785304gydF4y2Ba 研究文章gydF4y2Ba 有效的抗癌潜力蜂毒加载到真菌壳聚糖纳米粒子gydF4y2Ba https://orcid.org/0000 - 0002 - 5880 - 973 xgydF4y2Ba AlalawygydF4y2Ba 我爱迪尔。gydF4y2Ba 1gydF4y2Ba https://orcid.org/0000 - 0002 - 4347 - 6864gydF4y2Ba El RabeygydF4y2Ba 哈达德。gydF4y2Ba 1gydF4y2Ba 2gydF4y2Ba https://orcid.org/0000 - 0001 - 6951 - 1114gydF4y2Ba AlmutairigydF4y2Ba 法赫德M。gydF4y2Ba 1gydF4y2Ba https://orcid.org/0000 - 0001 - 9411 - 134 xgydF4y2Ba TayelgydF4y2Ba 艾哈迈德。gydF4y2Ba 3gydF4y2Ba https://orcid.org/0000 - 0002 - 8874 - 8659gydF4y2Ba Al-DuaisgydF4y2Ba 默罕默德。gydF4y2Ba 1gydF4y2Ba 4gydF4y2Ba https://orcid.org/0000 - 0002 - 7187 - 6419gydF4y2Ba ·阿里·齐达内gydF4y2Ba 赫拉。gydF4y2Ba 5gydF4y2Ba 6gydF4y2Ba https://orcid.org/0000 - 0003 - 3276 - 9503gydF4y2Ba SakrangydF4y2Ba 我默罕默德。gydF4y2Ba 1gydF4y2Ba 7gydF4y2Ba MakvandigydF4y2Ba PooyangydF4y2Ba 1gydF4y2Ba 生物化学部门gydF4y2Ba 理学院gydF4y2Ba 大学的武装力量gydF4y2Ba 沙特阿拉伯gydF4y2Ba ut.edu.sagydF4y2Ba 2gydF4y2Ba 生物信息学的部门gydF4y2Ba 遗传工程和生物技术研究所gydF4y2Ba 萨达特大学城市gydF4y2Ba 萨达特的城市gydF4y2Ba 埃及gydF4y2Ba usc.edu.eggydF4y2Ba 3gydF4y2Ba 水生和渔业科学教师gydF4y2Ba Kafrelsheikh大学gydF4y2Ba 埃及gydF4y2Ba kfs.edu.eggydF4y2Ba 4gydF4y2Ba 化学系gydF4y2Ba 理学院gydF4y2Ba Ibb大学gydF4y2Ba 也门gydF4y2Ba ibb-univ.netgydF4y2Ba 5gydF4y2Ba 营养与食品科学的部门gydF4y2Ba 家庭经济学院gydF4y2Ba 大学的武装力量gydF4y2Ba 沙特阿拉伯gydF4y2Ba ut.edu.sagydF4y2Ba 6gydF4y2Ba 家庭经济学系gydF4y2Ba 特殊教育学院gydF4y2Ba Kafrelsheikh大学gydF4y2Ba 埃及gydF4y2Ba kfs.edu.eggydF4y2Ba 7gydF4y2Ba 生物化学部分gydF4y2Ba 化学系gydF4y2Ba 理学院gydF4y2Ba 坦塔大学gydF4y2Ba 埃及gydF4y2Ba tanta.edu.eggydF4y2Ba 2020年gydF4y2Ba 23gydF4y2Ba 5gydF4y2Ba 2020年gydF4y2Ba 2020年gydF4y2Ba 10gydF4y2Ba 03gydF4y2Ba 2020年gydF4y2Ba 12gydF4y2Ba 04gydF4y2Ba 2020年gydF4y2Ba 17gydF4y2Ba 04gydF4y2Ba 2020年gydF4y2Ba 23gydF4y2Ba 5gydF4y2Ba 2020年gydF4y2Ba 2020年gydF4y2Ba 版权©2020阿德尔。Alalawy et al。gydF4y2Ba 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。gydF4y2Ba

壳聚糖及其纳米粒子(NPs)可以从许多真菌物种和生物活性化合物作为有效载体。真菌壳聚糖(FC)是创新了gydF4y2Ba 尖孢镰刀菌gydF4y2Ba菌丝生长,特点和用于合成NP和加载蜂毒(BV)。nano-FC (NFC)直径192.4 nm的意思是NP, 38.22%负荷容量,92.42%截留效率。BV释放NFC pH值和时间依赖性;破裂前6 h BV释放检测,其次是逐步释放多达30 h。的gydF4y2Ba 在体外gydF4y2BaNFC的抗癌潜力估值、BV和NFC / BV nanoconjugates对海拉子宫颈癌,发现他们都有强有力的抗癌活性存在剂量依赖的相关性;BV / NFC nanoconjugates是最有效的gydF4y2Ba 我gydF4y2Ba CgydF4y2Ba 50gydF4y2Ba =gydF4y2Ba 200年gydF4y2Ba μgydF4y2Ba ggydF4y2Ba /gydF4y2Ba 毫升gydF4y2Ba 。对海拉细胞的荧光染色法与BV / NFC nanoconjugates DAPI和吖啶橙/碘化propidium组合,表明早期凋亡的样子,二级细胞凋亡和继发性坏死标记及其增量曝光延长。NFC的生产gydF4y2Ba 病圃gydF4y2Ba及其加载BV强烈建议有效的天然抗肿瘤剂的生产活动对增强子宫颈癌。gydF4y2Ba

 大学的武装力量gydF4y2Ba 以序列- s - 1440 - 0133gydF4y2Ba 1。介绍gydF4y2Ba

壳聚糖(Cts),脱去乙酰基的惊人的氨基多糖提取甲壳素,有许多实用的优势(例如,其生物降解性、无毒性、生物相容性和有效生物活性)(gydF4y2Ba 1gydF4y2Ba]。Cts生物活性鼓励其生物利用率在频繁的应用程序(例如,药物输送,组织工程,抗癌治疗、抗菌配方,和愈合敷料)(gydF4y2Ba 2gydF4y2Ba]。Cts的指控和来自胺组的内容主要是其生物活性如若钥匙(如药物携带,mucoadhesion,抗菌活性、药物释放控制,gydF4y2Ba 原位gydF4y2Ba凝胶和渗透增强)(gydF4y2Ba 3gydF4y2Ba),提升其作为药物载体广泛应用和增强剂。Cts是充满希望地提取大量的真菌物种的生物量(gydF4y2Ba 4gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba 9gydF4y2Ba];真菌中提取壳聚糖(FC)有类似或更好的生物活性属性比习惯商业Cts。gydF4y2Ba

蜂毒(BV)公布的国防武器从蜜蜂(gydF4y2Ba 的蜜蜂gydF4y2Ba)当他们的殖民地是攻击。BV包含合成生物活性肽混合物,可以保护蜜蜂殖民地对捕食者的广泛多样性和侵略者。BV的含有生物活性成分包括蜂毒肽(BV的主要成分),adolapin, apamin,布满肽(肥大细胞),酶(透明质酸酶和磷脂酶A2),和一些nonpeptide成分(如多巴胺、组胺和去甲肾上腺素)(gydF4y2Ba 10gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 11gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

BV或其成分(例如,蜂毒肽)被广泛调查潜在的肿瘤治疗和抑制剂类型;他们表现出多个潜在的分子抗癌机制(gydF4y2Ba 11gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba 13gydF4y2Ba]。大量研究和评论记录验证的抗癌功能BV或蜂毒素对各种肿瘤类型(gydF4y2Ba 14gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba 18gydF4y2Ba];他们得出的结论是,BV和其组件有吉祥的抗癌细胞毒性药物与更广泛的频谱对多种肿瘤细胞类型。gydF4y2Ba

大多数生物医学领域的纳米技术的参与变得普遍,包括纳米材料应用程序本身作为抗菌,抗癌,抗病毒、和杀生的药物,或与生物活性药物加载/化合物增加溶解度,稳定、功能,对人体和交付(gydF4y2Ba 19gydF4y2Ba]。之后nanopolymers,尤其是nano-Cts和nano-FC(缩写为NFC),来自最评价纳米材料的生物活性和功能作为药物载体,biopreservatives,抗菌,抗癌,和基因传递药物,单独或与其他活性化合物合成gydF4y2Ba 3gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 20.gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba 23gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

Cts纳米颗粒被有效地用于运营商和增强剂不同的动物毒液包括蛇,蝎子,BV,评价作为抗癌药物(gydF4y2Ba 24gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba 28gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

因此,本研究有针对性的NFC的生产,与BV的加载,如若和评价和生物活性抑制子宫颈腺癌(海拉)细胞和阐明其潜在行动作为抗癌药物。gydF4y2Ba

 2。材料和方法gydF4y2Ba 2.1。真菌壳聚糖(FC)提取gydF4y2Ba

真菌的文化,gydF4y2Ba 尖孢镰刀菌gydF4y2Baf . sp。gydF4y2Ba medicaginisgydF4y2Ba此后,写明ATCC®52169™(缩写gydF4y2Ba 流分布gydF4y2Ba),此处用于生产FC。液体培养基和马铃薯葡萄糖琼脂媒体(PDB和PDA、Difco实验室、火花,MD)了gydF4y2Ba 流分布gydF4y2Ba文化传播和维护。真菌在PDB孵化延长7天激动有氧条件下28°C。FC提取完成根据Tayel et al。gydF4y2Ba 6gydF4y2Ba]。简单地说,种植后,gydF4y2Ba 流分布gydF4y2Ba菌丝通过过滤收获,洗去离子水(DW)和干在烘箱45°C。干gydF4y2Ba 流分布gydF4y2Ba菌丝被脱去蛋白质(使用1 M氢氧化钠),软化(使用1 M的醋酸),和脱去乙酰基(58%gydF4y2Ba wgydF4y2Ba /gydF4y2Ba vgydF4y2Ba 氢氧化钠溶液在110°C 90分钟);过滤和广泛的DW清洗后重复每一个步骤。FC脱乙酰作用程度(DDA)测定其红外光谱(傅里叶变换红外光谱学)光谱,利用巴克斯特等人公式(gydF4y2Ba 29日gydF4y2Ba]:gydF4y2Ba (1)gydF4y2Ba 银两gydF4y2Ba %gydF4y2Ba =gydF4y2Ba One hundred.gydF4y2Ba −gydF4y2Ba 一个gydF4y2Ba 1655年gydF4y2Ba 一个gydF4y2Ba 3450年gydF4y2Ba ×gydF4y2Ba 115年gydF4y2Ba ,gydF4y2Ba 而FC分子量(MW)测量通过色谱法(凝胶渗透附着示差折光检测器(爆后新星,你是,德国))。gydF4y2Ba

 2.2。合成Nanofungal壳聚糖富含蜂毒gydF4y2Ba

纳米粒子的合成(NPs)从FC和加载BV取决于先前的方法修改(gydF4y2Ba 20.gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 24gydF4y2Ba),使用公司的技术。简单,股票的解决方案是由FC(2.0毫克/毫升,在稀醋酸溶液),TPP(三聚磷酸钠,1.0毫克/毫升的DW),和BV(1.0毫克/毫升的DW)。TPP的解决方案是每分钟(350年的速度下降gydF4y2Ba μgydF4y2BaL / min)大力搅拌FC的解决方案,最终的比例gydF4y2Ba 足球俱乐部gydF4y2Ba :gydF4y2Ba 泛太平洋伙伴关系gydF4y2Ba =gydF4y2Ba 3gydF4y2Ba :gydF4y2Ba 1gydF4y2Ba wgydF4y2Ba /gydF4y2Ba wgydF4y2Ba 。TPP后搅拌持续60分钟下降,和导致照亮悬挂含有nanofungal壳聚糖(NFC)离心机gydF4y2Ba 28.000gydF4y2Ba ×gydF4y2Ba ggydF4y2Ba 与DW洗,recentrifuged和冻干。BV-loaded NFC的BV是首先解决方案添加到FC (BV 500的浓度gydF4y2Ba μgydF4y2Bag / mL),搅拌30分钟,然后TPP的解决方案和应用上述步骤。gydF4y2Ba

 2.3。描述合成NPsgydF4y2Ba 2.3.1。红外光谱分光光度法gydF4y2Ba

红外光谱(PerkinElmer™红外光谱诉10.03.08,德国)光谱FC, NFC、BV、BV / NFC纳米复合材料测量的波数450 - 4000厘米gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba。粉样本与溴化钾合并(比例1%,gydF4y2Ba wgydF4y2Ba /gydF4y2Ba wgydF4y2Ba ),他们的红外光谱透射光谱绘制。gydF4y2Ba

 2.3.2。NP相术的分析gydF4y2Ba

NP大小范围,意思是,中位数,分布(多分散性指数(PDI))和费用(电动电势)测量NFC和BV / NFC nanoconjugates使用Zetasizer(英国莫尔文仪器),基于DLS(动态光散射)技术。另外,形状、分布和大小的合成BV / NFC nanoconjugates筛选通过电子显微镜(传输)成像(TEM,徕卡™Leo0430,剑桥,英国);TEM碳涂层网格被指控NP方案和1%醋酸双氧铀,风干,加载到TEM考试。gydF4y2Ba

 2.4。评价BV封装和释放gydF4y2Ba 2.4.1。蛋白质的测定gydF4y2Ba

基于“布拉德福德的方法”,一个标准化的分析工具对蛋白质(皮尔斯™Coomassie,热Scientific-Pierce,罗克福德,IL)是NP操作决定免费BV浓度的解决方案。颜色从BV接合形成spectrophotometrically测量在595 nm的吸收。BSA(牛血清白蛋白)是利用蛋白质作为比较标准。gydF4y2Ba

 2.4.2。加载和封装效率测量gydF4y2Ba

指定的金额(10gydF4y2Ba μgydF4y2Bag)从BV-loaded NFC溶解在DW离心管的激烈的涡流,然后,解决方案是离心机gydF4y2Ba 28.000gydF4y2Ba ×gydF4y2Ba ggydF4y2Ba 35分钟10°C。BV承载能力(LC)和封装效率(EE)计算如下gydF4y2Ba 20.gydF4y2Ba]:gydF4y2Ba (2)gydF4y2Ba 信用证gydF4y2Ba %gydF4y2Ba =gydF4y2Ba 总gydF4y2Ba BVgydF4y2Ba 量gydF4y2Ba −gydF4y2Ba 免费的gydF4y2Ba BVgydF4y2Ba 在gydF4y2Ba 上层清液gydF4y2Ba NPgydF4y2Ba 重量gydF4y2Ba ×gydF4y2Ba One hundred.gydF4y2Ba ,gydF4y2Ba EEgydF4y2Ba %gydF4y2Ba =gydF4y2Ba 总gydF4y2Ba BVgydF4y2Ba 量gydF4y2Ba −gydF4y2Ba 免费的gydF4y2Ba BVgydF4y2Ba 在gydF4y2Ba 上层清液gydF4y2Ba 总gydF4y2Ba BVgydF4y2Ba 量gydF4y2Ba ×gydF4y2Ba One hundred.gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba

2.4.3。体外BV释放gydF4y2Ba

BV发布考试,BV / NFC-NPs离心后转移到干净的离心管与3毫升的醋酸缓冲(pH值5.2)或磷酸盐缓冲剂(PBS, pH值7.1)。保持在管gydF4y2Ba 37gydF4y2Ba ±gydF4y2Ba 1gydF4y2Ba °gydF4y2Ba CgydF4y2Ba ,100gydF4y2Ba μgydF4y2BaL样本采集的时间间隔2 h 30 h;然后,为每个样本的蛋白质spectrophotometrically测定含量。gydF4y2Ba

释放出来BV的蛋白质质量(gydF4y2Ba 米gydF4y2Ba 我gydF4y2Ba 在特定的时间()gydF4y2Ba 我gydF4y2Ba )计算如下gydF4y2Ba 20.gydF4y2Ba]:gydF4y2Ba (3)gydF4y2Ba 米gydF4y2Ba 我gydF4y2Ba =gydF4y2Ba CgydF4y2Ba 我gydF4y2Ba VgydF4y2Ba +gydF4y2Ba ∑gydF4y2Ba CgydF4y2Ba 我gydF4y2Ba −gydF4y2Ba VgydF4y2Ba 1gydF4y2Ba 年代gydF4y2Ba ,gydF4y2Ba 在哪里gydF4y2Ba CgydF4y2Ba 我gydF4y2Ba BV的浓度在发布解决方案在时间吗gydF4y2Ba 我gydF4y2Ba ,gydF4y2Ba VgydF4y2Ba 是发布解决方案总额,gydF4y2Ba VgydF4y2Ba 年代gydF4y2Ba 是体积样品。gydF4y2Ba

 2.5。NP抗癌活性gydF4y2Ba 2.5.1。细胞系的文化gydF4y2Ba

人类细胞行宫颈癌(海拉)获得EGY-NCI(国家癌症研究所,开罗,埃及)。海拉细胞的培养EMEM介质(补充了10% (gydF4y2Ba vgydF4y2Ba /gydF4y2Ba vgydF4y2Ba 谷酰胺)胎牛血清,2.0毫米,0.1毫米不重要的氨基酸,1.5 g / L NaHCOgydF4y2Ba3gydF4y2Ba和1.0毫米丙酮酸钠)进行调湿空气中5%的有限公司gydF4y2Ba2gydF4y2Ba在37°C。gydF4y2Ba

 2.5.2。NP抗增殖活动的评价gydF4y2Ba

BV / NFC-NPs抗增殖活动评估使用MTT (3 - (4 5-dimethylthiazole-2-yl) 2、溴化5-diphenyltetrazolium)还原试验(gydF4y2Ba 30.gydF4y2Ba]。在96孔聚苯乙烯板,每个含有100gydF4y2Ba μgydF4y2BaL在完全培养基,肿瘤细胞(gydF4y2Ba ~gydF4y2Ba 1gydF4y2Ba ×gydF4y2Ba 10gydF4y2Ba 4gydF4y2Ba )接种和孵化24 h湿润空气中5%的股份有限公司gydF4y2Ba2gydF4y2Ba在37°C。细胞粘附后,富国银行收到逐步大量的NFC, BV,和BV / NFC-NPs在DW溶解后,浓度范围0 - 500gydF4y2Ba μgydF4y2Ba从每个代理g / mL。另一个24小时的潜伏期后,添加了新的媒体替代治疗方案和10gydF4y2Ba μgydF4y2BaL (MTT的解决方案(5毫克/毫升的媒体没有酚红和血清)和盘子被另外进一步孵化3 h直到紫色甲瓒的颜色出现。上层清液后丢弃,甲瓒晶体溶解了100gydF4y2Ba μgydF4y2BaL DMSO和颜色评价540海里内吸光度1 h。平原DMSO作为控制。gydF4y2Ba

细胞生存能力(%)计算gydF4y2Ba 吸光度gydF4y2Ba 的gydF4y2Ba 治疗gydF4y2Ba /gydF4y2Ba 吸光度gydF4y2Ba 的gydF4y2Ba 控制gydF4y2Ba ×gydF4y2Ba One hundred.gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba

 2.5.3。海拉细胞凋亡的估值使用吖啶橙/ Propidium碘染色相结合gydF4y2Ba

海拉细胞潜在的细胞凋亡,与BV / NFC nanoconjugate治疗后,身价是通过结合染色和吖啶橙(AO)和propidium碘(π)gydF4y2Ba 31日gydF4y2Ba]。海拉细胞悬液(gydF4y2Ba ~gydF4y2Ba 2gydF4y2Ba ×gydF4y2Ba 10gydF4y2Ba 5gydF4y2Ba 细胞/毫升)处理BV NFC-NPs享年500岁gydF4y2Ba μgydF4y2Ba克/毫升浓度和孵化24和48 h湿润空气中5%的股份有限公司gydF4y2Ba2gydF4y2Ba在37°C。治疗和控制细胞使用PBS冲洗,然后用AO双彩色15分钟(10毫克/毫升)和π在黑暗中(4毫克/毫升)。图像被抓获(使用荧光显微镜奥林巴斯BX51,东京,日本)基于细胞凋亡的外观指标,即。,绿色、橙色、红点的细胞或细胞器,染色后在25分钟。gydF4y2Ba

 2.5.4。通过DAPI染色鉴定细胞凋亡gydF4y2Ba

BV / NFC-NPs-induced凋亡进一步分析使用核DAPI染色(4gydF4y2Ba ′gydF4y2Ba 6-diamidino-2-phenylindole)荧光染色法检测核酸DNA碎片和凝结在细胞治疗gydF4y2Ba 32gydF4y2Ba]。中提到的海拉细胞被处理为治疗部分gydF4y2Ba 2.5。3gydF4y2Ba;PBS洗涤之后,他们用多聚甲醛固定(4%)为12分钟,permeabilized缓冲区(包含0.5% Triton x - 100和3%多聚甲醛),然后50gydF4y2Ba μgydF4y2BaL (DAPI (1gydF4y2Ba μgydF4y2Bag / mL)添加浓度,保持了60分钟。被捕获的荧光显微图显示了解放和凝聚核碎片DAPI荧光染料染色。gydF4y2Ba

 3所示。结果gydF4y2Ba

FC提取和生产,gydF4y2Ba 流分布gydF4y2Ba菌丝生长,是实现这项工作。FC生产力是发酵培养基的2.41 g / L。生产FC有分子量51.6 kDa,银两的88.4%。gydF4y2Ba

离子凝胶化的过程有效性将FC转变为NFC和加载与BV。利用红外光谱揭示他们的生化结合和相互作用。gydF4y2Ba

的红外光谱光谱FC、NFC BV和NFC / BV nanoconjugates呈现在图gydF4y2Ba 1gydF4y2Ba。光谱的gydF4y2Ba Fom -gydF4y2Ba提取FC(图gydF4y2Ba 1gydF4y2BaFC),强大的峰值约3452厘米gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba对应于氢键和地延伸;- h拉伸(从主胺)在这个区域重叠。指定的吸收峰和乐队的FC检测到1718厘米gydF4y2Ba1gydF4y2Ba(羰基(C = O)拉伸的二级酰胺我带),峰值为1539厘米gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba和1324厘米gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba(指定酰胺二世(h)弯曲振动和酰胺的吸收三世,分别),和1079厘米gydF4y2Ba1gydF4y2Ba(属于C-O-C伸展)。NFC(图的频谱gydF4y2Ba 1gydF4y2Ba从FC频谱,NFC)显示一些差异;3452厘米的巅峰gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba在FC成为更广泛的在NFC放大相对强度,这表明氢键的增强。NFC光谱显示也大幅P = O峰值在1174 cm - 1,表明交联与TPP。一般来说,FC频谱的主要特征峰和乐队出现在NFC频谱,但其中微小的转移关闭波数。gydF4y2Ba

红外光谱谱真菌的分子合成壳聚糖(FC)、蜂毒(BV)、nano-FC (NFC),和BV / NFC纳米复合材料。gydF4y2Ba

BV的光谱,观察到的峰吸光度地区3250 - 3450厘米gydF4y2Ba1gydF4y2Ba表明h的自由振动拉伸。BV还表示特征酰胺的红外光谱谱带,即。,酰胺(1651厘米gydF4y2Ba1gydF4y2Ba),酰胺二世(1532厘米gydF4y2Ba1gydF4y2Ba),乐队在1112厘米gydF4y2Ba1gydF4y2Ba和1040厘米gydF4y2Ba1gydF4y2Ba表明无组织的线圈形态(图gydF4y2Ba 1gydF4y2Ba,BV)。红外光谱谱的NFC / BV nanoconjugate,拉伸- h BV吸收峰值的3318厘米gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba减少和转移到3421厘米吗gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba(图gydF4y2Ba 1gydF4y2Ba、NFC / BV)。BV的酰胺我表示乐队在1651厘米gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba也被转移到一个更高的波数(1654厘米吗gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba)在BV / NFC。gydF4y2Ba

从FC合成NP, BV的特征属性表中所示gydF4y2Ba 1gydF4y2Ba。gydF4y2Ba

合成纳米颗粒的特征属性从真菌壳聚糖(NFC)及其与蜂毒的纳米复合材料(BV / NFC)。gydF4y2Ba

纳米粒子gydF4y2Ba 尺寸范围(nm)gydF4y2Ba 平均直径(nm)gydF4y2Ba 平均直径(nm)gydF4y2Ba ZgydF4y2Ba 可能性(mV)gydF4y2Ba PDIgydF4y2Ba
NFCgydF4y2Ba 92.1 - -157.3gydF4y2Ba 121.6gydF4y2Ba 129.1gydF4y2Ba + 33.7gydF4y2Ba 0.262gydF4y2Ba
BV / NFC纳米复合材料gydF4y2Ba 147.3 - -269.6gydF4y2Ba 186.3gydF4y2Ba 192.4gydF4y2Ba + 27.2gydF4y2Ba 0.414gydF4y2Ba

NFC有较小的平均(平均)粒子直径、平均直径和尺寸范围比BV / NFC纳米复合材料。PDI值< 0.5为合成NPs NFC(0.262和0.414 BV / NFC纳米复合材料),这表明匹配和良好的NP大小分布(表gydF4y2Ba 1gydF4y2Ba)。NP类型都积极Z-potentialities;BV的加载到NFC略微降低了积极性从+ 33.7 (NFC) + 27.2 (BV / NFC纳米复合材料)。gydF4y2Ba

粒子的形状、大小和分布,进一步阐明了BV / NFC纳米复合材料,通过TEM图像(图gydF4y2Ba 2gydF4y2Ba)。nanoconjugate粒子主要出现在球面形状和光滑的表面,均匀分布的尺寸范围~ 168 - 256 nm(图gydF4y2Ba 2gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

透射显微图从真菌合成纳米复合材料壳聚糖和蜂毒。gydF4y2Ba

计算LC和EE, NFC BV的分别为92.42%和38.22。NFC的BV释放gydF4y2Ba 在体外gydF4y2Ba评估在pH值为5.2和7.0,通过直接分散在30 h的释放时间。从NFC BV释放模式是绘制在图gydF4y2Ba 3gydF4y2Ba。gydF4y2Ba

蜂毒发布概要文件从真菌壳聚糖纳米粒子在不同pH值(5.2和7.1)30 h释放期。gydF4y2Ba

BV释放pH值和时间的方式;BV的百分比低酸度7.1比5.2中被释放。释放模式显示在第一个6 h BV释放爆发;之后,逐渐释放检测与实验延长30 h。发布的BV比率分别为67.2和71.4%,此前6 h,和最大释放百分比分别为81.3%和76.2,持续时间结束,分别在pH值7.1 and5.2。gydF4y2Ba

NFC的抗癌潜力、BV、FC / BV-NPs测量衰减的海拉细胞生存能力,从合成药物暴露于不同浓度后,绘制在图gydF4y2Ba 4gydF4y2Ba。整个代理有强有力的抗癌活动对研究细胞;活动的所有代理都存在剂量依赖的相关性。最有力的代理是NFC / BV nanoconjugates BV和最后的NFC。经过24小时的暴露在浓度为500gydF4y2Ba μgydF4y2Bag / mL,只有22.3%和8.3的细胞治疗后仍然可行的NFC / BV-NPs BV,分别。200年gydF4y2Ba μgydF4y2Ba克/毫升浓度从NFC / BV-NPs可以杀死50%的癌细胞后24 h(图gydF4y2Ba 4gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

癌症细胞(海拉)可行性后接触nanofungal壳聚糖(FC-NPs),蜂毒(BV)及其纳米复合材料(FC / BV-NPs) 24小时使用不同浓度从他们每个人。gydF4y2Ba

荧光成像技术应用于阐明NFC的细胞毒性效应对检查癌细胞(图/ BV复合材料gydF4y2Ba 5gydF4y2Ba)。海拉细胞治疗后潜在的凋亡效应与NFC / BV nanoconjugates(在500年gydF4y2Ba μgydF4y2Ba克/毫升浓度)用DAPI染色(图了gydF4y2Ba 5gydF4y2BaDAPI)。接触nanoconjugate诱导可见形态细胞凋亡信号在海拉细胞治疗,例如,膜起泡,细胞收缩和舍入。gydF4y2Ba

海拉癌细胞的荧光显微成像,沾DAPI染色或吖啶橙/ propidium碘(AO / PI)双重染色,与500年治疗后gydF4y2Ba μgydF4y2Ba从蜂毒g / mL /真菌壳聚糖纳米粒子gydF4y2Ba ∗gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba ∗gydF4y2Ba C:控制(治疗)细胞;M:治疗细胞24小时;S:治疗细胞48 h。gydF4y2Ba

细胞凋亡大大增加,成为更有活力的迹象,与接触延长从24到48 h,包括大部分的治疗癌细胞。虽然没有控制细胞凋亡的迹象,但DAPI-stained治疗细胞有许多明亮会碎片/核;DNA缩合和凋亡信号急剧增加时间的方法。gydF4y2Ba

细胞凋亡和坏死进一步阐明通过AO / PI双荧光染色法(图gydF4y2Ba 5gydF4y2Ba、AO /π);可行的癌细胞出现与完好结构和绿色细胞和细胞核。细胞凋亡早期症状包括染色质凝结的外观和明亮的green-stained原子核,这显然从治疗24小时后出现NFC / BV nanoconjugate。二级坏死和凋亡后期明显迹象出现在海拉细胞治疗后48 h,染色质缩合,密集的orange-stained地区,和许多细胞核染色深橘红色。gydF4y2Ba

 4所示。讨论gydF4y2Ba

俱乐部的成就是成功进行的gydF4y2Ba 流分布gydF4y2Ba菌丝,这证实了调查表明真菌的高潜力作为壳聚糖生产可持续来源(gydF4y2Ba 4gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba 9gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 22gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 23gydF4y2Ba];这些调查建议FC的应用,从许多真菌物种,在生物医学和健康相关领域。gydF4y2Ba

FC的红外光谱分析鉴定其类似的结构/组标准化传统壳聚糖(gydF4y2Ba 6gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 33gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

许多特征峰和乐队的轻微改变FC谱在NFC近波数谱验证成功的NFC交联,合成目标NPs (gydF4y2Ba 22gydF4y2Ba]。NFC和NFC / BV光谱密切匹配的大多数生化组和波数强度;这表明BV没有化学影响或改变NFC结构和相应的保持在人体的生物安全使用(gydF4y2Ba 29日gydF4y2Ba]。红外光谱谱的NFC / BV nanoconjugate,延伸和拓宽切断(NFC)和降低拉伸强度- h (BV)及其转向小波数显示这些活跃的团体之间的氢键形成BV和NFC (gydF4y2Ba 34gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

获得的数据从“Zetasizer”,对于合成NFC和BV / NFC nanoconjugate透露,BV / NFC纳米粒子比NFC大号;这可能是由于增加的分子量和合成结构nanochitosan毒液后(gydF4y2Ba 27gydF4y2Ba),验证当前NFC携带BV的提升能力。对于成功的生物医学应用程序,功能纳米复合材料大多是一个NP制造尺寸范围从20到300海里,考虑到“最小的粒子可以达到身体的任何部分”(gydF4y2Ba 35gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

NFC的BV释放是非常快的在第一个6 h实验;这个破裂释放应该取决于BV离解NFC的表面,通常报道从加载蛋白质分子nanochitosan [gydF4y2Ba 21gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 36gydF4y2Ba]。此外,早期的快速释放和扩散的蛋白质分子表面的纳米颗粒被规定为不可否认[gydF4y2Ba 37gydF4y2Ba]。随后,BV缓慢释放似乎归因于NFC的裹入的缓慢降解的蛋白质分子和纳米颗粒本身的退化gydF4y2Ba 38gydF4y2Ba]。蛋白质的降解率应该超过其释放速度,经过长时间的释放期(gydF4y2Ba 39gydF4y2Ba]。此外,据报道,BV参与以不均匀的方式nanochitosan的长链,因此高百分比从它可以很容易地释放释放早期(gydF4y2Ba 28gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

BV的释放在pH值5.2高于在pH值7.1中,可以解释为壳聚糖的溶解性偏好弱酸性比在中性的解决方案解决方案;因此,pH值5.2条件可能会增加BV可溶性NFC的解放。gydF4y2Ba

海拉细胞的诱导凋亡/坏死,治疗后与BV / NFC nanoconjugate,证明通过与荧光染料染色。BV的致命效果/ NFC nanoconjugates欠BV抗癌潜力,可能主要是加强后加载到NFC。促进粒子的NFC polycationic自然是建议对肿瘤细胞,使更多的接触BV和细胞表面。gydF4y2Ba

动物毒液肽,尤其是BV,有巨大的发展潜力为生物制药,与许多局限性,可以克服他们的共轭聚合物人们像Cts增加它们的化学不稳定,半衰期,口服吸收,和目标细胞毒性gydF4y2Ba 40gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

虽然生产生物活性制剂(NFC和BV)提取真菌和昆虫来源,其他生物组件的transability这些生物对人体不会因为Cts和NFC主要是多糖提取与严厉的措施(例如,高碱度和温度),导致消除任何蛋白质残留,而BV从蜜蜂毒素腺体和获得是古代治疗各种疾病,没有证据申请在这些治疗(基因可转移性gydF4y2Ba 13gydF4y2Ba]。演示了Nanoformulations适合药物类分子的管理;聚合物人们可以提高药物的半衰期循环及其沉积与降低外渗到患病的网站健康/正常组织[gydF4y2Ba 41gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

BV抗癌活性是陈述主要取决于其有效成分和癌细胞之间的密切联系,发展是至关重要的细胞凋亡/坏死[gydF4y2Ba 42gydF4y2Ba]。蜂毒肽(BV)的主要蛋白质成分被确诊为癌症治疗是一种有效的生物活性剂(gydF4y2Ba 43gydF4y2Ba];蜂毒肽的主要建议功能涉及细胞膜微扰(导致溶血性和抗菌的后果)和有力的结构性变化的感应这些膜(包括孔隙的形成、囊泡形成和融合)(gydF4y2Ba 44gydF4y2Ba]。此外,蜂毒肽诱导肿瘤细胞周期逮捕验证,抑制其生长,细胞凋亡信号在不同的肿瘤细胞(gydF4y2Ba 12gydF4y2Ba]。有趣的是,BV蜂毒肽被证明特别追求从Ras致癌基因细胞的水平,即。肿瘤细胞(gydF4y2Ba 45gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

细胞凋亡被任命为BV的关键功能抗癌行动,后果从死亡受体(DR)核生长因子家族的刺激和失活(NF -κBgydF4y2Ba κgydF4y2BaB)在癌症细胞gydF4y2Ba 11gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

的应用AO / PI双荧光染色法,对量化的凋亡和坏死后果BV / NFC nanoconjugate海拉细胞,证实了其适用性和效率。变化在细胞染色用绿色、橙色、橘红色和指标对早期细胞凋亡,细胞凋亡后期,继发性坏死,分别说明(gydF4y2Ba 31日gydF4y2Ba]。肿瘤细胞死亡指标(细胞凋亡、坏死、溶解)被表示为潜在的机制,由BV可能抑制肿瘤的发展gydF4y2Ba 17gydF4y2Ba]。一项研究[gydF4y2Ba 46gydF4y2Ba]表明,BV抗癌活性更有力的反对国比海拉细胞;对两种细胞的效应与巧克力摄入量有关。BV的作用gydF4y2Ba 在活的有机体内gydF4y2Ba抑制肿瘤生长和扩散是写给涉及免疫反应的刺激淋巴结(gydF4y2Ba 42gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

有趣的是,BV说明诱导白血病细胞凋亡,对正常细胞无细胞毒性的骨髓gydF4y2Ba 15gydF4y2Ba];BV-induced白血病细胞凋亡的主要监管者caspase-3和bcl - 2通过抑制增殖作用信号路径(gydF4y2Ba 14gydF4y2Ba]。前流仪分析表明BV能力诱导活性氧(活性氧)生产,增加细胞质CagydF4y2Ba2 +gydF4y2Ba水平,释放细胞色素C由于线粒体膜电位降低,促进caspase-3激活,因此引起的细胞凋亡(gydF4y2Ba 16gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

BV结合位点的数量从碳水化合物/胺对癌细胞膜建议解释癌症的不同敏感性BV组件(gydF4y2Ba 46gydF4y2Ba];因此,这里可假定的是,加载与BV NFC可能产生更多的结合位点与海拉细胞膜和相应加强BV对这些细胞的抗增殖作用。gydF4y2Ba

现代方法NP安全评估建议的使用体外/体外模型作为基本先决条件为他们翻译成适用的产品(gydF4y2Ba 47gydF4y2Ba]。Safe-by-Design(作为)概念适用于纳米材料的评估和nanopolymer潜在后果对环境和人类健康和发展纳米药物的使用;根据最新的作为标准,NFC可以被视为一个理想的安全交付BV“nanobiocarrier”进入人体抗癌细胞(gydF4y2Ba 48gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 49gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

 5。结论gydF4y2Ba

菌丝生长的gydF4y2Ba 流分布gydF4y2Ba创新工作是FC源,成功地利用NFC生产与BV和加载。BV / NFC nanoconjugate有良好的结构和生化如若,再加上他们增强抗癌生物活性对宫颈细胞癌(海拉)。BV / NFC nanoconjugate可能诱发严重的在海拉细胞凋亡信号的时间和剂量依赖性的方式。BV的应用和额外的评价/ NFC nanoconjugates强烈推荐和天然抗癌药物一样有效。gydF4y2Ba

 数据可用性gydF4y2Ba

在生成的数据集和/或分析在当前研究可从相应的作者以合理的要求。gydF4y2Ba

 的利益冲突gydF4y2Ba

作者宣称没有利益冲突。gydF4y2Ba

 确认gydF4y2Ba

这项工作是支持的“科研、大学的院长职位或任期的武装力量,籍,”研究小组(下不。以序列- s - 1440 - 0133)。gydF4y2Ba

 RabeagydF4y2Ba e . I。gydF4y2Ba BadawygydF4y2Ba m E。gydF4y2Ba 史蒂文斯gydF4y2Ba c V。gydF4y2Ba SmagghegydF4y2Ba G。gydF4y2Ba SteurbautgydF4y2Ba W。gydF4y2Ba 壳聚糖作为抗菌剂:应用程序和行为模式gydF4y2Ba 《生物高分子gydF4y2Ba 2003年gydF4y2Ba 4gydF4y2Ba 6gydF4y2Ba 1457年gydF4y2Ba 1465年gydF4y2Ba 10.1021 / bm034130mgydF4y2Ba 2 - s2.0 - 0345257221gydF4y2Ba 14606868gydF4y2Ba 感觉gydF4y2Ba O。gydF4y2Ba 布利gydF4y2Ba P。gydF4y2Ba GurnygydF4y2Ba R。gydF4y2Ba 壳聚糖:一个惟一的多糖药物输送gydF4y2Ba 药物开发和工业药房gydF4y2Ba 1998年gydF4y2Ba 24gydF4y2Ba 11gydF4y2Ba 979年gydF4y2Ba 993年gydF4y2Ba 10.3109 / 03639049809089942gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 0031714427gydF4y2Ba 9876553gydF4y2Ba 阿里gydF4y2Ba 一个。gydF4y2Ba 艾哈迈德gydF4y2Ba 年代。gydF4y2Ba 回顾对壳聚糖及其纳米复合材料在药物输送gydF4y2Ba 国际期刊的生物大分子gydF4y2Ba 2018年gydF4y2Ba 109年gydF4y2Ba 273年gydF4y2Ba 286年gydF4y2Ba 10.1016 / j.ijbiomac.2017.12.078gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 85038879191gydF4y2Ba TayelgydF4y2Ba 答:一个。gydF4y2Ba 穆萨gydF4y2Ba 年代。gydF4y2Ba OpwisgydF4y2Ba K。gydF4y2Ba KnittelgydF4y2Ba D。gydF4y2Ba SchollmeyergydF4y2Ba E。gydF4y2Ba Nickisch-HartfielgydF4y2Ba 一个。gydF4y2Ba 抑制真菌微生物病原体的壳聚糖gydF4y2Ba 国际期刊的生物大分子gydF4y2Ba 2010年gydF4y2Ba 47gydF4y2Ba 1gydF4y2Ba 10gydF4y2Ba 14gydF4y2Ba 10.1016 / j.ijbiomac.2010.04.005gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 77953024816gydF4y2Ba 20416334gydF4y2Ba 穆萨gydF4y2Ba s . H。gydF4y2Ba TayelgydF4y2Ba 答:一个。gydF4y2Ba Al-TurkigydF4y2Ba 答:我。gydF4y2Ba 真菌评价壳聚糖作为生物防除和抗菌剂使用荧光标记gydF4y2Ba 国际期刊的生物大分子gydF4y2Ba 2013年gydF4y2Ba 54gydF4y2Ba 204年gydF4y2Ba 208年gydF4y2Ba 10.1016 / j.ijbiomac.2012.12.029gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 84872400398gydF4y2Ba 23270832gydF4y2Ba TayelgydF4y2Ba 答:一个。gydF4y2Ba 易卜拉欣gydF4y2Ba s i。gydF4y2Ba al-SamangydF4y2Ba m·A。gydF4y2Ba 穆萨gydF4y2Ba s . H。gydF4y2Ba 真菌壳聚糖的生产日期废物及其应用程序作为biopreservative肉末gydF4y2Ba 国际期刊的生物大分子gydF4y2Ba 2014年gydF4y2Ba 69年gydF4y2Ba 471年gydF4y2Ba 475年gydF4y2Ba 10.1016 / j.ijbiomac.2014.05.072gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 84903531901gydF4y2Ba 24942991gydF4y2Ba TayelgydF4y2Ba 答:一个。gydF4y2Ba GhariebgydF4y2Ba M . M。gydF4y2Ba 扎基gydF4y2Ba h·R。gydF4y2Ba ElguindygydF4y2Ba n·M。gydF4y2Ba Bio-clarification重金属和微生物流出的水利用真菌壳聚糖gydF4y2Ba 国际期刊的生物大分子gydF4y2Ba 2016年gydF4y2Ba 83年gydF4y2Ba 277年gydF4y2Ba 281年gydF4y2Ba 10.1016 / j.ijbiomac.2015.11.072gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 84949498462gydF4y2Ba 26645148gydF4y2Ba TayelgydF4y2Ba 答:一个。gydF4y2Ba 微生物壳聚糖作为biopreservative鱼香肠gydF4y2Ba 国际期刊的生物大分子gydF4y2Ba 2016年gydF4y2Ba 93年,文章部分gydF4y2Ba 41gydF4y2Ba 46gydF4y2Ba 10.1016 / j.ijbiomac.2016.08.061gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 84984671898gydF4y2Ba 27565293gydF4y2Ba AlsaggafgydF4y2Ba m . S。gydF4y2Ba 穆萨gydF4y2Ba s . H。gydF4y2Ba ElguindygydF4y2Ba n·M。gydF4y2Ba TayelgydF4y2Ba 答:一个。gydF4y2Ba 真菌壳聚糖和gydF4y2Ba 枸杞gydF4y2Ba提取anti-listeria和质量防腐剂在切碎的鲶鱼gydF4y2Ba 国际期刊的生物大分子gydF4y2Ba 2017年gydF4y2Ba 104年,文章部分gydF4y2Ba 854年gydF4y2Ba 861年gydF4y2Ba 10.1016 / j.ijbiomac.2017.06.097gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 85021734213gydF4y2Ba 28655659gydF4y2Ba 拉格拉曼gydF4y2Ba H。gydF4y2Ba 将挑战gydF4y2Ba 一个。gydF4y2Ba 蜂毒肽:membrane-active肽和多样化的功能gydF4y2Ba 生物科学报告gydF4y2Ba 2007年gydF4y2Ba 27gydF4y2Ba 4 - 5gydF4y2Ba 189年gydF4y2Ba 223年gydF4y2Ba 10.1007 / s10540 - 006 - 9030 - zgydF4y2Ba 2 - s2.0 - 34447282684gydF4y2Ba 17139559gydF4y2Ba PakgydF4y2Ba s . C。gydF4y2Ba Alvarez-SuarezgydF4y2Ba j . M。gydF4y2Ba 蜂毒的健康益处,并使用在医学gydF4y2Ba 蜜蜂产品——化学和生物属性gydF4y2Ba 2017年gydF4y2Ba 可汗、瑞士gydF4y2Ba 施普林格Int,酒吧。AG)gydF4y2Ba 287年gydF4y2Ba 306年gydF4y2Ba 10.1007 / 978 - 3 - 319 - 59689 - 1 - _14gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 85035099226gydF4y2Ba OršolićgydF4y2Ba N。gydF4y2Ba ŠvergydF4y2Ba lgydF4y2Ba BendeljagydF4y2Ba K。gydF4y2Ba BašićgydF4y2Ba 我。gydF4y2Ba 蜂毒的抗肿瘤活性gydF4y2Ba Periodicum BiologorumgydF4y2Ba 2001年gydF4y2Ba 103年gydF4y2Ba 49gydF4y2Ba 54gydF4y2Ba AufschnaitergydF4y2Ba 一个。gydF4y2Ba 科勒gydF4y2Ba V。gydF4y2Ba 哈利法塔gydF4y2Ba 年代。gydF4y2Ba Abd El-WahedgydF4y2Ba 一个。gydF4y2Ba 杜gydF4y2Ba M。gydF4y2Ba El-SeedigydF4y2Ba H。gydF4y2Ba ButtnergydF4y2Ba 年代。gydF4y2Ba Apitoxin及其组件对癌症、神经退化和风湿性关节炎:限制和可能性gydF4y2Ba 毒素gydF4y2Ba 2020年gydF4y2Ba 12gydF4y2Ba 2gydF4y2Ba 66年gydF4y2Ba 10.3390 / toxins12020066gydF4y2Ba 31973181gydF4y2Ba 在香港gydF4y2Ba 美国J。gydF4y2Ba RimgydF4y2Ba g S。gydF4y2Ba 杨gydF4y2Ba h . I。gydF4y2Ba 阴gydF4y2Ba c·S。gydF4y2Ba KohgydF4y2Ba h·G。gydF4y2Ba 张成泽gydF4y2Ba m . H。gydF4y2Ba 金gydF4y2Ba c·J。gydF4y2Ba 崔书记gydF4y2Ba b K。gydF4y2Ba 钟gydF4y2Ba j . H。gydF4y2Ba 蜂毒通过caspase-3激活凋亡类风湿性关节炎患者滑膜成纤维细胞gydF4y2Ba ToxicongydF4y2Ba 2005年gydF4y2Ba 46gydF4y2Ba 1gydF4y2Ba 39gydF4y2Ba 45gydF4y2Ba 10.1016 / j.toxicon.2005.03.015gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 20444497923gydF4y2Ba 15922390gydF4y2Ba 月亮gydF4y2Ba d . O。gydF4y2Ba 公园gydF4y2Ba s Y。gydF4y2Ba HeogydF4y2Ba m . S。gydF4y2Ba 金gydF4y2Ba k . C。gydF4y2Ba 公园gydF4y2Ba C。gydF4y2Ba KogydF4y2Ba w·S。gydF4y2Ba 崔gydF4y2Ba y . H。gydF4y2Ba 金gydF4y2Ba g . Y。gydF4y2Ba 主要监管机构蜜蜂venom-induced凋亡bcl - 2和caspase-3人类白血病U937细胞ERK和Akt的差别通过对这些基因gydF4y2Ba 国际免疫药理学gydF4y2Ba 2006年gydF4y2Ba 6gydF4y2Ba 12gydF4y2Ba 1796年gydF4y2Ba 1807年gydF4y2Ba 10.1016 / j.intimp.2006.07.027gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 33749679450gydF4y2Ba 17052670gydF4y2Ba 知识产权gydF4y2Ba s W。gydF4y2Ba 魏gydF4y2Ba h . C。gydF4y2Ba 林gydF4y2Ba j . P。gydF4y2Ba 郭gydF4y2Ba h . M。gydF4y2Ba 刘gydF4y2Ba k . C。gydF4y2Ba 许gydF4y2Ba s . C。gydF4y2Ba 杨gydF4y2Ba j·S。gydF4y2Ba Mei-DueyanggydF4y2Ba 赵gydF4y2Ba t·H。gydF4y2Ba 汉gydF4y2Ba s M。gydF4y2Ba 钟gydF4y2Ba j·G。gydF4y2Ba 蜂毒诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡在人类宫颈表皮样癌Ca滑雪细胞gydF4y2Ba 抗癌的研究gydF4y2Ba 2008年gydF4y2Ba 28gydF4y2Ba 2gydF4y2Ba 833年gydF4y2Ba 842年gydF4y2Ba 18507026gydF4y2Ba OršolićgydF4y2Ba N。gydF4y2Ba 在癌症治疗蜂毒gydF4y2Ba 癌症转移的评论gydF4y2Ba 2012年gydF4y2Ba 31日gydF4y2Ba 1 - 2gydF4y2Ba 173年gydF4y2Ba 194年gydF4y2Ba 10.1007 / s10555 - 011 - 9339 - 3gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 84862337185gydF4y2Ba 22109081gydF4y2Ba GajskigydF4y2Ba G。gydF4y2Ba Garaj-VrhovacgydF4y2Ba V。gydF4y2Ba 蜂毒肽:裂解肽具有抗癌特性gydF4y2Ba 环境毒理学和药理学gydF4y2Ba 2013年gydF4y2Ba 36gydF4y2Ba 2gydF4y2Ba 697年gydF4y2Ba 705年gydF4y2Ba 10.1016 / j.etap.2013.06.009gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 84880996730gydF4y2Ba 23892471gydF4y2Ba SahoogydF4y2Ba 美国K。gydF4y2Ba ParveengydF4y2Ba 年代。gydF4y2Ba 熊猫gydF4y2Ba J·J。gydF4y2Ba 纳米技术在人类的现在和未来的卫生保健gydF4y2Ba 纳米:纳米技术、生物学和医学gydF4y2Ba 2007年gydF4y2Ba 3gydF4y2Ba 1gydF4y2Ba 20.gydF4y2Ba 31日gydF4y2Ba 10.1016 / j.nano.2006.11.008gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 33947225700gydF4y2Ba 氮化镓gydF4y2Ba Q。gydF4y2Ba 王gydF4y2Ba T。gydF4y2Ba 壳聚糖纳米粒子制造蛋白质交付carrier-systematic考试条件有效的装载和释放gydF4y2Ba 胶体和表面B: BiointerfacesgydF4y2Ba 2007年gydF4y2Ba 59gydF4y2Ba 1gydF4y2Ba 24gydF4y2Ba 34gydF4y2Ba 10.1016 / j.colsurfb.2007.04.009gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 34347324085gydF4y2Ba 17555948gydF4y2Ba JarudilokkulgydF4y2Ba 年代。gydF4y2Ba TongthammachatgydF4y2Ba 一个。gydF4y2Ba BoonamnuayvittayagydF4y2Ba V。gydF4y2Ba 制备壳聚糖纳米粒子对封装和释放的蛋白质gydF4y2Ba 韩国化学工程杂志》上gydF4y2Ba 2011年gydF4y2Ba 28gydF4y2Ba 5gydF4y2Ba 1247年gydF4y2Ba 1251年gydF4y2Ba 10.1007 / s11814 - 010 - 0485 - zgydF4y2Ba 2 - s2.0 - 79955603435gydF4y2Ba AlshararigydF4y2Ba 年代。gydF4y2Ba TayelgydF4y2Ba 答:一个。gydF4y2Ba 穆萨gydF4y2Ba s . H。gydF4y2Ba 土壤校正nano-fungal壳聚糖对重金属生物吸附gydF4y2Ba 国际期刊的生物大分子gydF4y2Ba 2018年gydF4y2Ba 118年,文章B部分gydF4y2Ba 2265年gydF4y2Ba 2268年gydF4y2Ba 10.1016 / j.ijbiomac.2018.07.103gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 85050087120gydF4y2Ba 30030076gydF4y2Ba El RabeygydF4y2Ba h·A。gydF4y2Ba AlmutairigydF4y2Ba f·M。gydF4y2Ba AlalawygydF4y2Ba 答:我。gydF4y2Ba Al-DuaisgydF4y2Ba m·A。gydF4y2Ba SakrangydF4y2Ba m . I。gydF4y2Ba ·阿里·齐达内gydF4y2Ba n S。gydF4y2Ba TayelgydF4y2Ba 答:一个。gydF4y2Ba 增强控制耐药gydF4y2Ba 假丝酵母gydF4y2Ba种虫害通过氟康唑加载到真菌壳聚糖纳米粒子gydF4y2Ba 国际期刊的生物大分子gydF4y2Ba 2019年gydF4y2Ba 141年gydF4y2Ba 511年gydF4y2Ba 516年gydF4y2Ba 10.1016 / j.ijbiomac.2019.09.036gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 85071886863gydF4y2Ba DounighigydF4y2Ba n·M。gydF4y2Ba DamavandigydF4y2Ba M。gydF4y2Ba ZolfaghariangydF4y2Ba H。gydF4y2Ba MoradigydF4y2Ba 年代。gydF4y2Ba 准备和壳聚糖纳米粒子含有特征gydF4y2Ba Hemiscorpius lepturusgydF4y2Ba蝎毒作为抗原输送系统gydF4y2Ba 档案Razi研究所gydF4y2Ba 2012年gydF4y2Ba 67年gydF4y2Ba 145年gydF4y2Ba 153年gydF4y2Ba DounighigydF4y2Ba N。gydF4y2Ba MehrabigydF4y2Ba M。gydF4y2Ba AvadigydF4y2Ba m·R。gydF4y2Ba ZolfaghariangydF4y2Ba H。gydF4y2Ba RezayatgydF4y2Ba M。gydF4y2Ba 壳聚糖纳米粒子的制备、表征和稳定性调查的加载gydF4y2Ba Echis鳍gydF4y2Ba蛇毒作为小说输送系统gydF4y2Ba 档案Razi研究所gydF4y2Ba 2015年gydF4y2Ba 70年gydF4y2Ba 269年gydF4y2Ba 277年gydF4y2Ba Mohammadpour DounighigydF4y2Ba N。gydF4y2Ba EskandarigydF4y2Ba R。gydF4y2Ba AvadigydF4y2Ba m·R。gydF4y2Ba ZolfaghariangydF4y2Ba H。gydF4y2Ba 米尔穆罕默德SadeghigydF4y2Ba 一个。gydF4y2Ba RezayatgydF4y2Ba M。gydF4y2Ba 壳聚糖的制备和体外表征纳米粒子含有gydF4y2Ba Mesobuthus eupeusgydF4y2Ba蝎毒作为抗原输送系统gydF4y2Ba 有毒的动物和毒素包括热带疾病杂志》上gydF4y2Ba 2012年gydF4y2Ba 18gydF4y2Ba 1gydF4y2Ba 44gydF4y2Ba 52gydF4y2Ba 10.1590 / s1678 - 91992012000100006gydF4y2Ba 罗查苏亚雷斯gydF4y2Ba k . S。gydF4y2Ba 卡多佐丰gydF4y2Ba j·L。gydF4y2Ba 奥利维拉BitencourtgydF4y2Ba m·A。gydF4y2Ba 桑托斯gydF4y2Ba k·s·c·R。gydF4y2Ba Silva-JuniorgydF4y2Ba 答:一个。gydF4y2Ba Fernandes-PedrosagydF4y2Ba m F。gydF4y2Ba 血清生产对gydF4y2Ba Tityus serrulatusgydF4y2Ba蝎毒immunoadjuvant使用交联壳聚糖纳米粒子gydF4y2Ba ToxicongydF4y2Ba 2012年gydF4y2Ba 60gydF4y2Ba 8gydF4y2Ba 1349年gydF4y2Ba 1354年gydF4y2Ba 10.1016 / j.toxicon.2012.09.010gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 84867367042gydF4y2Ba 23006936gydF4y2Ba 塔希尔gydF4y2Ba f。gydF4y2Ba MoselhygydF4y2Ba w·A。gydF4y2Ba 默罕默德gydF4y2Ba 答:F。gydF4y2Ba DidamonygydF4y2Ba s E。gydF4y2Ba MetwalleygydF4y2Ba k . M。gydF4y2Ba 扎耶德gydF4y2Ba 答:B。gydF4y2Ba 的制备和表征虾壳聚糖和评估的效率作为癌症治疗蜂毒交付gydF4y2Ba 国际高级研究杂志》上gydF4y2Ba 2017年gydF4y2Ba 5gydF4y2Ba 5gydF4y2Ba 370年gydF4y2Ba 388年gydF4y2Ba 10.21474 / IJAR01/4122gydF4y2Ba 巴克斯特gydF4y2Ba 一个。gydF4y2Ba 狄龙gydF4y2Ba M。gydF4y2Ba 安东尼•泰勒gydF4y2Ba k·D。gydF4y2Ba 罗伯茨gydF4y2Ba g·a·F。gydF4y2Ba 改进方法为起始点确定N-acetylation度的壳聚糖gydF4y2Ba 国际期刊的生物大分子gydF4y2Ba 1992年gydF4y2Ba 14gydF4y2Ba 3gydF4y2Ba 166年gydF4y2Ba 169年gydF4y2Ba 10.1016 / s0141 - 8130 (05) 80007 - 8gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 0026771901gydF4y2Ba 1390449gydF4y2Ba ChowrasiagydF4y2Ba D。gydF4y2Ba KarthikeyangydF4y2Ba C。gydF4y2Ba ChouregydF4y2Ba lgydF4y2Ba SahabjadagydF4y2Ba 古普塔gydF4y2Ba M。gydF4y2Ba 艾尔沙德gydF4y2Ba M。gydF4y2Ba TrivedigydF4y2Ba P。gydF4y2Ba 合成、表征、活性抗癌症的氟化3 6-diaryl - (1、2、4) triazolo [3、4 b] [1, 3, 4] thiadiazolesgydF4y2Ba 阿拉伯化学杂志gydF4y2Ba 2017年gydF4y2Ba 10gydF4y2Ba S2424gydF4y2Ba S2428gydF4y2Ba 10.1016 / j.arabjc.2013.08.026gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 84884560772gydF4y2Ba HajrezaiegydF4y2Ba M。gydF4y2Ba PaydargydF4y2Ba M。gydF4y2Ba LooigydF4y2Ba c . Y。gydF4y2Ba MoghadamtousigydF4y2Ba 美国Z。gydF4y2Ba HassandarvishgydF4y2Ba P。gydF4y2Ba SalgagydF4y2Ba m . S。gydF4y2Ba KarimiangydF4y2Ba H。gydF4y2Ba 沙姆斯gydF4y2Ba K。gydF4y2Ba ZahedifardgydF4y2Ba M。gydF4y2Ba 马吉德gydF4y2Ba n。gydF4y2Ba 阿里gydF4y2Ba h . M。gydF4y2Ba 阿卜杜勒gydF4y2Ba m·A。gydF4y2Ba 基于新型希夫CdCl凋亡的影响gydF4y2Ba2gydF4y2Ba(CgydF4y2Ba14gydF4y2BaHgydF4y2Ba21gydF4y2BaNgydF4y2Ba3gydF4y2BaOgydF4y2Ba2gydF4y2Ba)复杂是通过激活介导的线粒体通路在结肠癌细胞gydF4y2Ba 科学报告gydF4y2Ba 2015年gydF4y2Ba 5gydF4y2Ba 1,第9097条gydF4y2Ba 10.1038 / srep09097gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 84924807598gydF4y2Ba 拉赫曼gydF4y2Ba m·A。gydF4y2Ba 侯赛因gydF4y2Ba 一个。gydF4y2Ba methanolic提取的抗癌活性和细胞凋亡诱导效应gydF4y2Ba 科迪亚dichotomagydF4y2Ba反对人类癌症细胞系gydF4y2Ba 孟加拉国药理学杂志》上的报告gydF4y2Ba 2015年gydF4y2Ba 10gydF4y2Ba 1gydF4y2Ba 27gydF4y2Ba 34gydF4y2Ba 10.3329 / bjp.v10i1.20883gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 84920493914gydF4y2Ba TayelgydF4y2Ba 答:一个。gydF4y2Ba 穆萨gydF4y2Ba s . H。gydF4y2Ba El-TrasgydF4y2Ba w·F。gydF4y2Ba ElguindygydF4y2Ba n·M。gydF4y2Ba OpwisgydF4y2Ba K。gydF4y2Ba 经壳聚糖处理后抗菌纺织品gydF4y2Ba 黑曲霉gydF4y2Ba菌丝的浪费gydF4y2Ba 国际期刊的生物大分子gydF4y2Ba 2011年gydF4y2Ba 49gydF4y2Ba 2gydF4y2Ba 241年gydF4y2Ba 245年gydF4y2Ba 10.1016 / j.ijbiomac.2011.04.023gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 79957968561gydF4y2Ba 21596059gydF4y2Ba 乔gydF4y2Ba M。gydF4y2Ba 陈gydF4y2Ba D。gydF4y2Ba 郝gydF4y2Ba T。gydF4y2Ba 赵gydF4y2Ba X。gydF4y2Ba 胡gydF4y2Ba H。gydF4y2Ba 马gydF4y2Ba X。gydF4y2Ba 影响蜂毒peptide-copolymer并交付系统的交互gydF4y2Ba 国际制药学杂志gydF4y2Ba 2007年gydF4y2Ba 345年gydF4y2Ba 1 - 2gydF4y2Ba 116年gydF4y2Ba 124年gydF4y2Ba 10.1016 / j.ijpharm.2007.05.056gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 36148998772gydF4y2Ba 17629639gydF4y2Ba 克鲁格gydF4y2Ba h·F。gydF4y2Ba 芯gydF4y2Ba P。gydF4y2Ba 纳米毒理学:一个跨学科的挑战gydF4y2Ba 《应用化学》(国际患儿用英语)gydF4y2Ba 2011年gydF4y2Ba 50gydF4y2Ba 6gydF4y2Ba 1260年gydF4y2Ba 1278年gydF4y2Ba 10.1002 / anie.201001037gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 79551672488gydF4y2Ba 21290492gydF4y2Ba 氮化镓gydF4y2Ba Q。gydF4y2Ba 王gydF4y2Ba T。gydF4y2Ba 科克伦gydF4y2Ba C。gydF4y2Ba 说睡觉gydF4y2Ba P。gydF4y2Ba 灯的表面电荷,粒子大小和形态chitosan-TPP纳米颗粒用于基因传递的性质gydF4y2Ba 胶体和表面B: BiointerfacesgydF4y2Ba 2005年gydF4y2Ba 44gydF4y2Ba 2 - 3gydF4y2Ba 65年gydF4y2Ba 73年gydF4y2Ba 10.1016 / j.colsurfb.2005.06.001gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 23444441931gydF4y2Ba 16024239gydF4y2Ba 周gydF4y2Ba 年代。gydF4y2Ba 邓gydF4y2Ba X。gydF4y2Ba 李gydF4y2Ba X。gydF4y2Ba 调查小说core-coated微球蛋白质输送系统gydF4y2Ba 《控释gydF4y2Ba 2001年gydF4y2Ba 75年gydF4y2Ba 1 - 2gydF4y2Ba 27gydF4y2Ba 36gydF4y2Ba 10.1016 / s0168 - 3659 (01) 00379 - 0gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 0035838448gydF4y2Ba 11451494gydF4y2Ba 周gydF4y2Ba 年代。gydF4y2Ba 邓gydF4y2Ba X。gydF4y2Ba 元gydF4y2Ba M。gydF4y2Ba 李gydF4y2Ba X。gydF4y2Ba 调查准备和蛋白质释放生物可降解聚合物微球作为药物运输系统gydF4y2Ba 应用聚合物科学杂志》上gydF4y2Ba 2002年gydF4y2Ba 84年gydF4y2Ba 4gydF4y2Ba 778年gydF4y2Ba 784年gydF4y2Ba 10.1002 / app.10327gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 0037171574gydF4y2Ba AmidigydF4y2Ba M。gydF4y2Ba RomeijngydF4y2Ba s G。gydF4y2Ba BorchardgydF4y2Ba G。gydF4y2Ba JungingergydF4y2Ba h·E。gydF4y2Ba HenninkgydF4y2Ba w·E。gydF4y2Ba JiskootgydF4y2Ba W。gydF4y2Ba 的制备和表征包N-trimethyl壳聚糖纳米粒子作为鼻输送系统gydF4y2Ba 《控释gydF4y2Ba 2006年gydF4y2Ba 111年gydF4y2Ba 1 - 2gydF4y2Ba 107年gydF4y2Ba 116年gydF4y2Ba 10.1016 / j.jconrel.2005.11.014gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 33344467489gydF4y2Ba 16380189gydF4y2Ba 多斯桑托斯gydF4y2Ba 答:P。gydF4y2Ba de AraujogydF4y2Ba t·G。gydF4y2Ba Radis-BaptistagydF4y2Ba G。gydF4y2Ba 纳米粒子携带venom-derived肽和毒素制药应用gydF4y2Ba 当前医药生物技术gydF4y2Ba 2020年gydF4y2Ba 21gydF4y2Ba 2gydF4y2Ba 97年gydF4y2Ba 109年gydF4y2Ba 10.2174 / 1389201020666190621104624gydF4y2Ba 31223083gydF4y2Ba BissogydF4y2Ba 年代。gydF4y2Ba LerouxgydF4y2Ba j . C。gydF4y2Ba Nanopharmaceuticals:专注于临床可译性gydF4y2Ba 国际制药学杂志gydF4y2Ba 2020年gydF4y2Ba 578年,第119098条gydF4y2Ba 10.1016 / j.ijpharm.2020.119098gydF4y2Ba OršolićgydF4y2Ba N。gydF4y2Ba svgydF4y2Ba lgydF4y2Ba VerstovsekgydF4y2Ba 年代。gydF4y2Ba TerzicgydF4y2Ba 年代。gydF4y2Ba 基本gydF4y2Ba 我。gydF4y2Ba 乳房癌体外细胞增殖和抑制肿瘤生长蜂毒的体内gydF4y2Ba ToxicongydF4y2Ba 2003年gydF4y2Ba 41gydF4y2Ba 7gydF4y2Ba 861年gydF4y2Ba 870年gydF4y2Ba 10.1016 / s0041 - 0101 (03) 00045 - xgydF4y2Ba 2 - s2.0 - 0038751806gydF4y2Ba 12782086gydF4y2Ba 邓普西gydF4y2Ba c, E。gydF4y2Ba 在膜蜂毒肽的行为gydF4y2Ba Biochimica et Biophysica学报gydF4y2Ba 1990年gydF4y2Ba 1031年gydF4y2Ba 2gydF4y2Ba 143年gydF4y2Ba 161年gydF4y2Ba 10.1016 / 0304 - 4157 (90)90006 - xgydF4y2Ba 2 - s2.0 - 0025217893gydF4y2Ba 2187536gydF4y2Ba LeuschnergydF4y2Ba C。gydF4y2Ba 汉斯gydF4y2Ba W。gydF4y2Ba 膜破坏裂解肽对癌症治疗gydF4y2Ba 当前的药物设计gydF4y2Ba 2004年gydF4y2Ba 10gydF4y2Ba 19gydF4y2Ba 2299年gydF4y2Ba 2310年gydF4y2Ba 10.2174 / 1381612043383971gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 3042737827gydF4y2Ba 15279610gydF4y2Ba 沙玛gydF4y2Ba s V。gydF4y2Ba 蜂毒肽抵抗:counterselection ras转换gydF4y2Ba 致癌基因gydF4y2Ba 1992年gydF4y2Ba 7gydF4y2Ba 2gydF4y2Ba 193年gydF4y2Ba 201年gydF4y2Ba 1549345gydF4y2Ba OršolićgydF4y2Ba N。gydF4y2Ba 博来霉素的强化在海拉和国细胞杀伤力蜂毒gydF4y2Ba 工业卫生和毒理学的档案gydF4y2Ba 2009年gydF4y2Ba 60gydF4y2Ba 3gydF4y2Ba 317年gydF4y2Ba 326年gydF4y2Ba 10.2478 / 10004-1254-60-2009-1936gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 73549084526gydF4y2Ba 19789161gydF4y2Ba 芯gydF4y2Ba P。gydF4y2Ba ChortareagydF4y2Ba 年代。gydF4y2Ba GuenatgydF4y2Ba o . T。gydF4y2Ba RoessleingydF4y2Ba M。gydF4y2Ba StuckigydF4y2Ba j . D。gydF4y2Ba HirngydF4y2Ba 年代。gydF4y2Ba Petri-FinkgydF4y2Ba 一个。gydF4y2Ba Rothen-RutishausergydF4y2Ba B。gydF4y2Ba nanosafety vitro-ex体内模型中系统评估gydF4y2Ba 欧洲的纳米医学杂志gydF4y2Ba 2015年gydF4y2Ba 7gydF4y2Ba 3gydF4y2Ba 169年gydF4y2Ba 179年gydF4y2Ba 10.1515 / ejnm - 2014 - 0049gydF4y2Ba 2 - s2.0 - 84931097363gydF4y2Ba 耶稣gydF4y2Ba 年代。gydF4y2Ba 垃圾gydF4y2Ba M。gydF4y2Ba 耶鲁大学管理学院gydF4y2Ba C。gydF4y2Ba BorchardgydF4y2Ba G。gydF4y2Ba 芯gydF4y2Ba P。gydF4y2Ba 博尔赫斯gydF4y2Ba O。gydF4y2Ba 风险评估聚合物随着纳米药物输送:我们能从文学到目前为止gydF4y2Ba 在生物工程和生物技术前沿gydF4y2Ba 2019年gydF4y2Ba 7gydF4y2Ba 261年gydF4y2Ba 10.3389 / fbioe.2019.00261gydF4y2Ba 垃圾gydF4y2Ba M。gydF4y2Ba 博尔赫斯gydF4y2Ba O。gydF4y2Ba 耶稣gydF4y2Ba 年代。gydF4y2Ba BorchardgydF4y2Ba G。gydF4y2Ba PeralegydF4y2Ba G。gydF4y2Ba 辛gydF4y2Ba M。gydF4y2Ba 口gydF4y2Ba 一个。a·j·a . M。gydF4y2Ba Soeteman-HernandezgydF4y2Ba l·G。gydF4y2Ba 芯gydF4y2Ba P。gydF4y2Ba 耶鲁大学管理学院gydF4y2Ba C。gydF4y2Ba 方法论的safe-by-design方法纳米药物的发展gydF4y2Ba 在生物工程和生物技术前沿gydF4y2Ba 2020年gydF4y2Ba 8gydF4y2Ba 258年gydF4y2Ba 10.3389 / fbioe.2020.00258gydF4y2Ba