TY -的A2 Milea德牧盟——Aslantas Yaprak盟——Surmeli努尔Basak PY - 2019 DA - 2019/06/20 TI -氨基端和c端Polyhistidine标记对稳定性的影响和作用的高温P450 CYP119 SP - 8080697六世- 2019 AB -生物催化剂在合成制药和受欢迎的农药由于其高区域选择性和选择性。在生物催化剂中，含有血红素的细胞色素P450 (P450)氧合酶是一个吸引人的目标，因为它们可以高效地催化“未激活”的碳氢键的氧化。CYP119是一种嗜酸、嗜热的P450 硫化叶菌acidocaldarius，由于在高温和低温环境下具有活性，具有广泛应用于生物催化剂的潜力。多组氨酸标记(His-tags)被广泛用于简化蛋白质的纯化。然而，his标签可以引起蛋白质结构和功能的改变。在这里，我们展示了他标签对CYP119的影响。为此，在CYP119的n端或c端克隆his标记，表达并分离his标记蛋白。检测了his标记的CYP119s的热稳定性和过氧化物酶活性，并与野生型CYP119进行了比较。结果表明，添加his标记不仅提高了CYP119的产量，简化了分离过程，而且还影响了活性位点的电子结构和蛋白的活性。我们发现，n端his标记的CYP119具有令人满意的性能，并有潜力应用于工业应用，但由于his标记影响了血红素铁活性位点的电子特性，因此使用该蛋白的机理研究需要仔细解释。SN - 1565-3633 UR - https://doi.org/10.1155/2019/8080697 DO - 10.1155/2019/8080697 JF -生物无机化学及应用PB - Hindawi KW - ER -