抽象性
研究的目的是评价Graves对位词分析器的分布并评估Megpridnoroone治疗对外围血单核细胞子集的影响边际血液子集通过流细胞测量分析 )非活动GO )和GEDs没有GO )控件控件 );外加有GO作用的病人 )分析分三大时点完成,即Mecpridnisoone处理前和6周后和12周处理后PBMC分片中类粒子开发器百分比比GO控件外GD类分片使用率低得多(GO控件除外)(GO控件除外)(GD类分片使用率则低得多)(GO控件除外)。 )此外,MDC文件还记录为与GO负关联的一个独立因素,但活动阶段和不活动阶段之间没有基本差分另一方面,我们没有观察到发展中国家接受甲状腺素治疗的百分比有任何变化 )在当前研究中,我们已经成功初步显示-据我们所知-血液mDCs与GO事件负相关
开工导 言
格雷夫斯轨道感知器是格雷夫斯病最常见的非曲直表现自限制活动阶段,继而非活动阶段重力轨道对症仍然是一个难解的临床问题,在多数情况下,严重主动疾病的治疗选择仅限于类固醇[一号..缺乏对GO结果的具体医学治疗方法-大都来自对疾病病原体理解不足近距离甲状腺自动机疾病继续出现重大突破,但在识别与GO相关致病机制方面的进展不令人满意。
监管豁免涉及非常复杂的系统局部过程,视许多监管单元类型活动而定。中央和外围免疫力分解自动机疾病,包括GO,主要归因于免疫规管不足机制预防自反进程包括免疫细胞群参与中央和外围容度-主要是嵌入式细胞
endritic细胞可触发自反应T单元或激活规范T单元,视成熟模拟和/或DC子集而定此外,作为最有效的抗原展示细胞,发展中国家是养分豁免的重要调控者,以这种方式连接宿主国防两大分支
环形人类二元组通常占外围血单核细胞的0.5-2%,分类为类状二元组和等素二元组2..物型函数不尽相同myeloid子集被认为负责感应传播TH1-TH17驱动免疫响应3..等离子细胞DC特征显示有能力隐藏大量I型插件并诱导二分解4并管理单元5,6..
其他重要PBMC单元单细胞作用器并分解成子集CD14和CD16基于这些参数,单细胞划分为主“经典”分片,CD14表达度高,子群小得多,方块高方表示CD167,8..影响单细胞子集分布的因素和子集自免作用记录不足
研究的目的是确定活跃和/或闲置GO病人与无GO或健康控件GD病人之间在DC上是否有任何差异,以及Mecopridnoroone处理方式如何影响DC子群分布据我们所知,本项研究是首次尝试评估血液区子集,由GO病人研究DC活动以及免疫抑制法效果
二叉材料方法
学习参与者从洛兹医科大学内分治和元病系招聘注册前,所有参与者都根据Lodz医科大学伦理学委员会批准的研究协议(RNN206/12/KE)签署知情同意并填入GO生活质量问卷研究对象包括17名从中度到重度主动GO型病人、8名不活动BERGO型病人、8名GD非GO型病人和15名健康安眠自愿适配研究组(控件)完全临床和人口数据注册一号)
GO所有病人,无眼病或轨迹肿瘤,GD非GO病人最终通过临床表现和实验室检验诊断评估GO活动时,我们使用临床活动评分和磁共振成像控制对象为安眠药,无自动机疾病,包括自动机甲状腺疾病主动GO所有病人都用静脉甲片素处理基于EUGO建议的治疗进度表-组成12周注入(6周注入0.5克,随后是6周注入0.25克)。
外围血样采集 过夜快速液化输血法(针线表19)避免慢流取和/或创伤性毒液血样从同一位主动Go病人连续三次采集:直接在类固醇管理前6周后和12周类固醇课程后主动GO病人在类固化前采集的血液样本用于四组间进一步比较分析
2.1.流频激活细胞排序分析
同一天使用FACSCantoIIQQQ和FACSDIVAZ软件(BD生物科学社圣何塞CA
边际血液分解基于验血嵌入式细胞抗原表层表达模式外围血液开发中心染色如下:i)CD141/BDCA3二)CD303/BDCA2
单克隆抗体(mAb)专供BDCA抗原使用,从MiltenyiBiotec购买(Bergisch Gladbach,德国)。其余所有mAb和适当的异型控件均从BD生物科学药剂厂购买(San Jose,CA,USA)。
其它细胞群染有下列抗体:i)CD16阳性反体3G8鼠标IgG1二)CD19阳性:反CD19反体 (4G7鼠标IgG1)三)CD14阳性抗体M5E2鼠标IgG2a四)CD3阳性:反CD3抗体
mAb孵化后,红细胞用FAS解析法解析法解码法解析法解码法解析法解码法解析法解码法解码法解码法解码法解码法解码法解码法解码法leukocyte分片用冷磷缓冲盐水冲刷两次,计数并悬停在PBS中供FACS分析为了避免非专用抗体绑定,所有分析都应用阻塞试剂(Miltenyi生物tec,BergischGladbach,德国)。DC子群分析盲目化,结果表示成百分数
图中显示流细胞分析示例块显示分析leukocyte群格策略一号.
(a)
(b)
(c)
2.2.统计分析
统计分析使用Statistica13.1ANOVA Kruskal-Wallis测试用于判定主动GO、非主动GO和GD病人所有参数差异的重要性ANOVAFriedman测试和Wercoxon匹配测试被用来判定所有测参数在甲片素治疗前后和期间差异的重要性单变量和多变量逻辑回归分析用于确定哪些连续变量可能与GO关联一号..深入分析TSH、甲状腺激素、TSH受体抗体和甲状腺处理之间的关系131号配有免疫元素由Spearman级阶相关A级 值小于0.05被认为具有统计意义
3级结果
量化流细胞分析显示,GO中MDCs(CD141)整体分片比GO低得多(主动和不活动),GO和GD没有GO和控件,后两个组间没有观察到差分(后两个组间没有观察到差分)( )下图2)
pDC百分比(CD303)比控件低得多 )但不证明比GD病人低 );但同时未发现GO控件GD病人之间的统计差异3)
与前点处理相比,Mecpridnisoone在12周处理后显著下降CD14lowCD16+分配率 )下图4)关于发展中国家百分比问题,Mecepridisolone管理没有影响pds分布 )mDCs )
后续分析临床参数(TSH、甲状腺激素、TSHR抗体水平和甲状腺处理)与免疫细胞群的关联2.pDC群显示与胸膜处理呈负相关关系,单细胞证明与自由甲状腺激素水平有正相关关系131号I理疗表2)mDCs和考虑的所有变量之间没有发现相关关系2)
GO组变量如TSH、FT3、FT4和TSHR抗体级数以及有关免疫细胞群线性变量均受单向回归模型约束模型的目的是确定哪些连续变量可能与GO相关联pDCs(CD303)和mDCs(CD141)确实构成负关联GO线性因子,TSHR抗体则正关联GO3)
这三个变量即pDCs、mDCs和TSHR抗体接受第二步回归分析,即多变回归分析,mDCs(CD141)证明是唯一与GO负关联的独立因素(表表)。4)通过逻辑回归模型分析结果与ANOVA Kruskal-Wallis测试所获结果非常相似大样本通常在统计中推荐使用,但在样本规模低得多和特殊情况下统计师一般接受进行回归分析一号特别是当结果可预期或经其他统计测试确认时
最后,GO组(主动加非活动性)向单向回归模型提交线性变量说明免疫细胞群模型的目的是确定哪些连续变量可独立连接活动GO然而,所有测得变量证明无关性(数据未显示)。
4级讨论
重力疾病是一种复杂的自动机疾病,不仅甲状腺,而且轨道组织都受到影响。因此,我们决定评估发展中国家边缘血液中 GD期间GO病人分布, 并计及此病理生成的复杂性
到目前为止,数项研究报告GD中存在DsLeskela和同事研究中,作者显示重GD患者外围循环小数并发甲状腺中pDC数增加九九..类似结果由Hassan和同事获取此外,GD病人脖子淋巴结中pds数比nodual goitre病人多10..显示pds迁移外围血源和甲状腺积聚对比而言,毛工和同事报告未处理GD/UGD最高比例,UGD中pDC/DC最高比例[GD和Hashmoto甲状腺炎11..文献中存在点差差差 关于GD中子分布与健康控件相比,我们在研究中观察到GD小数pDC2)!但由于pDC数非异差分布,这一差差没有达到统计意义此外,GO内有DC子集至今尚未定性
与健康控件和GD无GO对象相比,主动和不活动病人中MDC百分比下降极为重要的是观测到,在许多线性变量中(包括TSHR抗体),一种mDC被证明与GO独立相关联(负相关联)因此,根据我们的发现,可以得出结论MDC比TSHR抗体更强联通GO
前几次研究显示,甲状腺状态可影响嵌入式细胞子集Dedecjus和同事的研究结果显示,L-thyroxine置换法在甲状腺下会增加mDCs和pDCs12..在这次研究中,我们确认MDCs和甲状腺测试(TSH、FT3、FT4和TSHR抗体)之间没有任何关系,这表明GO的存在可能比甲状腺机能失常更有力地影响这些类型DC分布的因素同样重要的还有发现既不用胸动药处理,也不用胸动药处理131号理疗确实会影响MDC水平取而代之的是,研究结果确认pDC百分数负关联性理疗,部分解释毛和同事先前研究结果,显示uGD最大比例pDC11..然而,pDC对GO病理生成的意义需要进一步研究。
关于mDCs,我们记录到,这类DC的血位不取决于GO活动因此,根据我们的结果,可以说MDC与GO的存在密切相关,而没有其他临床或生化因素相助
Myeloid进化细胞数量极小的免疫细胞组成,在健康个体中仅占PBMC百分数的百分百分之一百数据有限,但MDC下降可能在GO病理生成中起歧视性作用GO病人mDC的缩放可能是GD和GO产生病理的偏差,这解释了为什么只在某些GD中出现偏向轨道的原因
并产生假设 mDCs可能迁移到GO的轨道组织Eckstein和同事研究将极地免疫细胞描述为主动和不活动甲状腺关联眼科显示,在所有受检条件中均没有DC13..Fang和同事的研究结果确认GO轨道微环境由嵌入式细胞组成。GO连接组织表示基因表示抗原显示细胞,最有趣的是,控制轨道组织与GO相比少得多抗原显示细胞14..此外,上述研究的结果确认TH17电路响应GO14..如前所述MDCs关联TH17响应综合研究结果和Fang和同事研究后,预计MDCs从循环向轨道组织迁移并参加GO因此,我们认为,应展开附加研究以澄清这一趣味方面基于结果,pDC移入轨道组织不可排除然而,我们的结果并不表示赞成这样一种可能性。
基于上述观察,我们考虑了一种可能性,即不仅甲型甲型六氯环己烷状态可能与发展中国家数目相关联,而且与免疫抑制处理相关联。为了调查这种可能性,我们对主动GO治疗甲型甲状腺素的病人进行了调查
研究中Mecepridisolone管理没有影响DC子集的百分比所得结果确认GO活动 类固醇改变活动
另一方面,我们确认CD14lowCD16+单片处理后数量下降Eckstein和同事上述研究与我们发现一致,确认单细胞类处理GO渗透近轨组织减少单细胞变换在GO类固醇免疫抑制活动中可能起相关作用我们的发现可能构成未来研究基础,目的是调查对免疫抑制处理的反应与GO免疫状态之间的联系微小数GO病人会削弱最终结论,
5级结论
据我们所知,以前没有发表过有关发展中国家GO作用的报告在当前研究中,我们已经成功证明血液mDCs与GO事件负相关mDC比例变化可帮助GO产生病理记得四大类中之一(主动GO住院者)是在actopridnoroone处理下评估的类固疗法没有影响DC子集的百分比
解释GO自动机进程可能导致开发新式治疗策略,如DCs等免疫机能细胞
数据可用性
流细胞分析数据支持本研究发现应请求从相关作者处获取
利益冲突
作者声明此论文的发布不存在利益冲突
感知感知
作者想感谢ProfessionMariusz StasioQek Lodz医科大学神经科进行极值方法学咨询这项研究得到波兰洛兹医科大学法定资金的资助(503-03-003-11-001-19)。