目标. 探讨人参皂苷Rg1对人骨髓间充质干细胞（hBM-MSCs）分化的影响。探讨了Rg1影响间充质干细胞分化的合理机制。方法. 流式细胞仪用于细胞鉴定。采用分化培养法研究hBM-MSCs的分化能力。南非-β-gal染色用于检测细胞衰老水平。Western blot和免疫荧光法检测蛋白表达水平。RT-qPCR检测mRNA表达水平。结果. Rg1调节hBM-MSCs的分化。分化培养分析显示Rg1促进细胞成骨和软骨形成。Western blot结果显示，Rg1可调节大鼠脑组织中β-连环蛋白信号通路与GSK-3磷酸化的调节β. 葛兰素史克-3β抑制剂(Licl)可显著增加rg1诱导的GSK-3磷酸化β从而降低Rg1诱导的hBM-MSCs分化。结论. 人参皂苷Rg1通过抑制GSK-3的磷酸化作用降低衰老细胞Wnt途径的过度激活β调节间充质干细胞分化能力。

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Sox9是一种与骨髓间充质干细胞（BMSCs）软骨发生谱系的测定和维持相关的内源性转录因子。在最近的研究中，我们已经证明碎片状软骨细胞聚集体（细胞块）可以促进BMSCs在体内的软骨生成。然而，BMSCs/软骨细胞砖的比例是否对三维软骨再生有显著影响及其分子机制尚不清楚。为了解决这一问题，本研究将三组具有不同兔骨髓基质细胞/软骨细胞块比率（1 ： 2、1 ： 1和2 ： 1）的细胞复合物皮下注射到裸鼠体内。采用大体形态学观察、组织学和免疫组化、生化、基因表达分析、western blot等方法，比较不同BMSCs/软骨细胞砖比例对组织工程软骨性能的影响，探讨其相关分子机制。1 ： 1 BMSCs/软骨细胞砖（B1CB1）组的构建导致软骨持续生成，形态合适，中央营养灌注充足，无骨化。其相关机制是B1C1组Sox9表达增加，通过上调ColⅡ、下调RUNX2和上调Nkx3下调Col-X和Col-I下游，促进软骨形成，抑制BMSCs成骨。本研究表明，1:1的比例是适宜的，Sox9-Nkx3.2-RUNX2通路是一种相关机制，在软骨细胞砖和PRP构建的BMSCs稳定软骨发生的生态位中发挥了重要作用。

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腹膜纤维化(fibrosis, PF)是腹膜透析(PD)的一种长期并发症，影响腹膜膜(PM)功能。脂肪组织来源的间充质干细胞(ASC)具有免疫调节作用，可能是一种阻断PF的策略。本研究的目的是分析ASC在尿毒症大鼠实验性PF模型中的作用。为了模拟长期PD患者的临床情况，Wistar大鼠建立了以PF与慢性肾病(CKD)联合为特征的联合模型。大鼠喂食含0.75%腺嘌呤的饮食30天，诱发CKD合并尿毒症。用葡萄糖酸氯己定(CG)腹腔注射，于第15 ~ 30天诱导PF。 第15天和第21天静脉注射ASC。大鼠分为5组：对照组，正常大鼠；CKD，腺嘌呤饮食大鼠；PF，CG饮食大鼠；CKD+PF，PF饮食大鼠；CKD+PF+ASC，PF饮食尿毒症大鼠。用Masson三色染色法测定PF。通过免疫组化、多重分析和qPCR评估炎症和纤维化相关因素。与对照组和CKD组相比，PF组和CKD+PF组的PM厚度和炎症明显增加。ASC治疗可阻断PF的发展。此外，促生长因子（TGF）的上调-βASC可显著改善CKD+PF组大鼠肌成纤维细胞的表达。除抗纤维化作用外，ASC还具有抗炎作用，可避免白细胞浸润和炎性细胞因子（IL-1）的过度表达β，TNF-α和IL-6）在气相色谱诱导的PM中的表达。ASC对CKD+PF实验模型中PF的发生有抑制作用，可能是由于其免疫调节作用。这些结果提示ASC可能是治疗PD相关性纤维化的一种潜在策略。

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脂肪来源的基质血管分数(SVF)是自体细胞移植的有效来源。然而，SVFs的质量和数量取决于患者的年龄、并发症和其他因素。在这项研究中，我们开发了一种方法，通过外科手术，可重复地增加脂肪来源的SVFs的细胞数量和改善其质量，我们称之为“伤口修复启动”。BALB/c小鼠腹股沟区皮下脂肪经手术处理(启动)，切碎脂肪组织(损伤)，结扎皮下供油动脉(缺血)。启动程序后第0、1、3、5或7天分离SVFs。通过对差异表达基因进行微阵列和通路分析，检测引物SVFs的基因表达水平。用流式细胞术分析引物SVFs细胞成分的变化。将SVFs移植到同基因缺血后肢中，检测其血管生成和再生潜能。采用激光多普勒血流灌注成像仪测量后肢血流量，缺血组织的CD31染色定量毛细血管密度。荧光免疫染色和Western blotting分别测定了HIF-1和VEGF-A合成在SVFs中的稳定性。 As a result, the number of SVFs per fat weight was increased significantly on day 7 after priming. Among the differentially expressed genes were innate immunity-related signals on both days 1 and 3 after priming. In primed SVFs, the CD45-positive blood mononuclear cell fraction decreased, and the CD31-CD45-double negative mesenchymal cell fraction increased on day 7. The F4/80-positive macrophage fraction was increased on days 1 and 7 after priming. There was a serial decrease in the mesenchymal-gated CD34-positive adipose progenitor fraction and mesenchymal-gated CD140A-positive/CD9-positive preadipocyte fraction on days 1 and 3. Transplantation of primed SVFs resulted in increased capillary density and augmented blood flow, improving regeneration of the ischemic limbs. HIF-1 alpha was stabilized in the primed cutaneous fat原地吸后的涂底漆的SVFs和VEGF-A的合成是在一峰上5天。因此伤口修复吸导致增加数量和增强血管生成潜力SVFs。

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虽然神经干细胞（NSCs）在中枢神经系统（CNS）损伤后可以向损伤方向迁移，但由于CNS损伤后粘附配体和细胞外基质（ECM）梯度的组成和密度受到干扰，迁移能力一直受到限制。迄今为止，人们已经开发出各种方法来增强NSC的迁移，并且已经确定了一些影响NSC迁移潜力的因素。采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫组化方法检测原代NSCs中actinα2（ACTA2）的表达。其次，探讨ACTA2对NSC迁移的调节作用及其可能的机制。我们的结果显示ACTA2在NSCs中表达。同时，利用siRNA下调ACTA2通过增加RhoA表达和降低Rac1表达来阻止肌动蛋白丝聚合，从而抑制NSC的迁移。本研究可丰富ACTA2在神经干细胞迁移中的基础知识，为提高神经干细胞迁移潜能开辟途径，为中枢神经系统损伤后功能恢复提供干预靶点。

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微空间培养是诱导多能干细胞（iPSCs）自组织化的一种有效途径。然而，用于成骨分化的微球的最佳大小尚不清楚。我们假设一个特定的微空间大小可以促进自组织的iPSC分化形成骨样组织体外. 本研究的目的是探讨微球大小对成骨结构移植后骨再生的影响。分离的小鼠牙龈成纤维细胞来源的iPSCs被镀在超低附着性的微球培养孔中，每个孔含有数百个U形底部微孔点，在生长培养基中形成细胞聚集体。微孔孔径/深度不同（400/560 μ米（Elp400），500/700 μ米（Elp500），和700分之900 μm（Elp900））（库拉雷；Elplasia）。5天后，细胞在成骨诱导培养基中保持35天。只有Elp500条件下的细胞在成骨诱导过程中紧密聚集并保持高活性。经过10天的诱导，Elp500细胞结构显示出明显的高表达运行2,成骨相关转录因子抗体,胶原蛋白1 a1,骨钙素,骨唾液蛋白,骨桥蛋白与Elp400和Elp900中的结构相比。在亚甲蓝复染von Kossa染色和Movat的pentachrome染色中，只有Elp500结构在第35天表现出强大的类骨形成，I型胶原（一种主要的类骨成分）和骨钙素蛋白高表达。将细胞构建物移植到大鼠颅骨缺损中，3周后的显微CT分析显示，与Elp900组相比，Elp500组具有更好的骨修复效果，骨密度显著升高。这些结果表明，微球大小影响iPSCs的自组织成骨分化。Elp500微球培养特异性诱导小鼠IPSC形成具有高骨再生能力的骨样组织。

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