抽象性

后台.Corona病毒和轮子病毒最常关联小牛腹泻,导致农民生产力和经济损失由corona病毒和轮状病毒在埃塞俄比亚小牛群中引起的腹泻疾病方方面面理解不足2018年11月至2019年5月在埃塞俄比亚Oroma中心区(比绍福图、塞巴塔、Holeta和亚的斯亚贝巴)进行了剖面研究,目的是隔离和分子描述corona病毒和轮子病毒四个研究区有目的选择,用简单随机采样采集排泄物样本,使用抗原检测寄生虫测试包诊断corona病毒和轮子病毒感染此外,进行此项研究是为了深入了解昆虫病毒和轮子病毒感染的流行程度和相关风险因素结果.研究期间,从小牛采集的83个腹泻样本和162个非腹泻排泄物样本小牛不到4周后检测冠状病毒和轮状病毒83个腹泻样本中,1个样本(1.2%)阳性冠状病毒抗原,Ag-ELISA发现6个样本阳性(7.2%)正性轮状病毒抗原所有非腹泻样本均阴性冠状病毒和轮状病毒Ag牛群中冠状病毒和轮状病毒总体感染率估计分别为0.4%(1/245)和2.45%(6/245)。ELISA测试所有样本(7)corona病毒和轮子病毒均在Madin-Darby肾细胞传播3个后续通道后观察到累进细胞分治效果(71.4%)和销毁5个样本单层细胞(1个冠状病毒样本和4个轮状病毒样本)(71.4%)分子级反转转录酶聚合链响应技术使用专用素量测定corona病毒和轮子病毒核酸的存在ELISA5个样本为corona病毒和轮子病毒抗原阳性并开发细胞文化CPE受感染率在雄性小牛大一二周峰值结论.冠状病毒和轮状病毒引起的腹泻疾病在小牛中有很大健康问题,它中断生产效益,减肥增量和增死亡率并有可能传播动物学当前发现显示埃塞俄比亚小牛的corona病毒和轮子病毒感染,需要通过在新生小牛中进行早期共生喂养、使用疫苗或改善牲畜管理加以解决。

开工后台

新生儿幼崽腹泻是全世界大型动物兽医所遇最富挑战性临床综合症之一由多因子代理物产生,如病毒、细菌和原生形一号..单寄生病毒和轮子病毒占约27-36%2结为最常见的病毒进化病原体

Corona病毒Nidovirales家庭科罗那维里达和子家庭科罗那维耶封装病毒并有正面感知单串RNA基因组基因组尺寸介于26至32千基长间,COVs拥有最大RNA病毒基因组,对哺乳动物和鸟类的肠道、呼吸道或神经标志负责。CV基于抗原和遗传特性分为三大类:α-CoVs辰族-COVs南锥体-CoVs波音冠状病毒(BCOV)归类辰族-CoVs,它也包括关系密切HCOV-OC43,引起人和人体病原体呼吸道感染SARS-CoV和MERS-CoV3和最新SARS-COV-2

Bovinecona病毒先被发现为新生儿小牛严重腹泻的代理物与小牛和成人发生呼吸困难相关4,5..协同基因组编码四大结构粒子:峰值蛋白质、核卡普西德蛋白质、薄膜蛋白质和信封蛋白质6..

高遗传多样性可归结于高突变率RNA复制、高复构频数子系和大数子病毒基因组寄生病毒重组在病毒进化中发挥重要作用并可能导致新病理类型[7..迄今已广泛报告S基因重构区域8..BCOV通过排气管或呼吸道传输九九..寄生细胞分别在呼吸道和肠道、鼻轮素、气管和肺中感染,小肠和大肠树和密码并发复制引出病毒 鼻腔分解和粪便诱发病理的重要因素仍未充分探索,例如病毒传入动物不久后如何切入临床信号从零到重不等,包括发烧、呼吸标志和带或无血腹泻10..

Rota病毒原型RNA病毒家庭reviridae由八大类组成Orthoreo病毒、Orbi病毒、Corti病毒、Rota病毒,qio病毒、Cypo病毒、Phytoreo病毒并斐济病毒.Rota病毒特征为三大抗原特征:群类子类和Sero类型A类轮状病毒是人类和动物的主要病原体70纳米直径轮状粒子由双层单片封装,内含核心粒子,内含双串RNA11段,每个段代表1个基因11..遗传恢复机制是产生轮子病毒遗传多样性并最终实现病毒进化的重要机制之一12..

corona病毒和轮子病毒是最公认的病原体 在全球牛牛小牛中引起急性腹泻13..人体和动物也都确认它为急性腹泻的主要病原体并有可能产生动物学经济效果14..

Corona病毒和轮子病毒分布于世界环境并经过深入研究15,16..多项研究报告BROV染病率20-60%17,18号..全世界腹泻小牛样本中冠状病毒流行率估计介于4%至38.9%。在发展中国家,冠状病毒和轮状病毒的流行率为38.9%和16.7%[19号..Corona病毒和轮子病毒在埃塞俄比亚研究不力亚伯拉罕等仅有一份报告[19号表示Corona病毒38.9%和Riva病毒16.7%存在于埃塞俄比亚中部小牛缺乏资讯可能是缺乏策略控制corona病毒和轮子病毒感染的原因,缺少对埃塞俄比亚小牛群中corona病毒和轮子病毒的隔离和分子定性研究可能加剧问题因此,需要检测可乐病毒循环菌株和轮子病毒分离和分子进化,以规划国内适当的控制与预防措施

因此,当前研究的目标是i)检测小牛子不到一个月的corona病毒和轮子病毒二)估计流行程度并识别小牛群中冠状病毒和轮状病毒感染的风险因素三)使用PCR分解并描述病毒特征

二叉方法论

2.1.描述研究区

当前研究于2018年11月至2019年5月在埃塞俄比亚Oroma中心四大选定区(Bishoftu、Sebata、Holeta和Actiba一号)Faecal样本采集自四大选产奶牛农场代表着选定地区的许多小型、中型和大型奶牛农场,这些农场向邻近城镇和城郊消费者提供牛奶和奶制品奶牛养殖场内有本地或异国品种,视生产规模而定

比绍福图市东Shewa区发现,奥罗米亚州分局位于首都亚的斯亚贝巴东南约45公里处面积位于9摄氏度和40摄氏度,海拔1850米国家气象局(NMA)(2016年)表示,年雨量866毫米,其中84%在长雨季(6月至9月),年最小和最高温度分别为11摄氏度和29摄氏度比绍福图市养殖家畜有30887牛店、43138家禽、9322Equinee、9294绵羊和4753山羊(比绍福图市行政农业台,2014年)。

塞贝塔镇位于Oromia特区Oromia大区Finfinne亚地斯亚贝巴西南25公里高海拔1800-3385米,北纬855-8.917摄氏度和3837-38.617摄氏度平均年降雨量为1073毫升,温度介于11.3至28摄氏度之间总面积102758千米20码..资料取自SebetaHawas区行政办公室20码家畜养殖和作物生产是大多数社区的主要经济活动区内养大牛包括牛、绵羊、山羊和家禽

Holeta镇位于该国中部31公里以西Oroma州西Shewa行政区8°53+75+9°14+38°21+40+38+36+14+14镇上面积5550公顷Holeta镇平均海拔2449米年均最大温度和最小温度分别为25.9和7.2摄氏度21号..

首都埃塞俄比亚亚的斯亚贝巴海拔2300米,北纬9°1#48#N和西经38°44#24#E高地气候典型化,温度介于11摄氏24摄氏度亚的斯亚贝巴年均降水量为1300毫米并配有双模式分布22号..

2.2.学习人口

研究用小牛健康或有腹泻临床信号,即大水腹泻、系统脱水和冷漠等方式进行。30天以下牛群包括所有品种和性寄生式强化管理条件都参与了研究。drarhoea可考虑粪便半液化,有或无血液或粘膜存在等其他异常特征牛排没有这些特征被认为是非腹泻或看似健康23号..

2.3学习设计

2018年11月至2019年5月在埃塞俄比亚中部四处选址Oromaa(Bishuftu、Sebeta、Holeta和Acti小牛信息通过访谈农场主和选定学习网站动物卫生工作者收集小牛经临床检查是否出现腹泻,并采集排泄物样本诊断测试采样时,农场名称、采样日期、排泄物一致性、年龄、品种和标签号均以正确记录格式录入每一头牛

2.4.采样技巧和样本大小测定

启动实战研究前,初步数据取自相关区农业局和乳品合作社,将奶品农场列表记录为大规模、中型和小型奶品农场估计学习人口规模研究区有目的地选择和识别,基础是交通无障碍性、地理位置和奶牛农场丰量获取更多小牛诊断性疾病非疾病小牛采样以隔离并描述轮子病毒特征七大奶牛农场的小块,即Cenesis农场、Asterwaqu奶农农场、MamaDairy农场、SisayDimmaDairy农场、HaddishDairy农场、FantuDairy农场和Holeta农业研究中心Dairy农场和有代表性的680中小型奶牛农场小块随机样本被选作研究对象采样单元既有局部和交叉奶牛小分队,产期至1个月不等。农场划分成小中型大类分别基于牛群大小5-20和21-50并大于50头牛大农场采样最少10%小牛

集群采样法用于从中小型奶牛农场选择小牛群。研究群采样框架取自Bishuftu、Sebeta、亚的斯亚贝巴和Holeta的乳品合作社共有680名中小型奶制品生产者注册学习区乳品合作社170奶制品生产者使用系统随机采样技术采样^线程制片人)记录采样框架选择的奶农没有牛或孕牛6个月组装日期时,该农代为另一名主要来自附近地区的奶农样本群采规模通过调整样本规模来确定,为简单随机采样计算调整为平均集群大小和集群内关联函数,数学表达方式如下: 去哪儿N级=采样规模集群采样N级=样本大小计算简单随机采样m=平均集群大小华府=集群内部关联

然而,在本研究中,平均牛群规模(每个奶牛农场小数)为1.6集群小发现集群内部关联效果小N级近似N级.样本大小计算随机采样直接取为样本大小本研究估计小牛轮状病毒的流行程度时,样本大小使用简单随机采样法判定24码,25码.. 去哪儿 =预期流行性d级=期望精度(5%)d级²N级=样本大小

使用预期轮子病毒流行率16.7%19号置信度95% 绝对精度5% 确定中小型奶牛园214样本研究期间共录用245小分队提高精度并比较不同群落分布其中包括214小牛680中小型奶牛农场和31小牛7大奶牛农场

2.4.1集合异种样本

法卡样本在用纸巾清洗肛门区后用消毒管采集,用可移植消毒塑料手套用索引指打直肠23号..大约30克粪便素材直接从小牛直肠中用一次性胶手套采集采集样本放入装有冰盒的普遍冰盒并运至Sebeta国家动物健康诊断调查中心病毒实验室,并存储到-80摄氏度处理

2.5facecal样本处理

2018年11月至2019年5月向塞贝塔国家动物健康诊断和调查中心提交二百四十五个排泄物样本faecal样本编译为0.01M磷酸盐缓冲saline中排泄物10%(wt/vl)悬浮PH7所有样本离心值为1500xg,超导体测试后储存在-80°C无菌小瓶中供进一步研究

2.6实验室技术

2.6.1.ELISA检测波文科罗那病毒和波文罗塔病毒抗原

多屏幕AG-ELISA卡尔夫文摘ive(BIOK31/1/Belgi三明治ELISA程序是根据制造商指令执行的

光密度测量为450纳米时使用ELISA板阅读器

2.6.2提取波文科罗那病毒和罗塔病毒RNA

Corona病毒和轮子病毒RNAs根据制造商指令使用QIAamp病毒RNA小包提取约1g排泄物样本加到1ml磷酸盐缓冲盐混合脉冲强达40秒,然后在10 000分方程5分后发生离心作用全部超常数(约500件/500件/多件/多件/多件/多件/多件/多件/多件/多件/多件/多件/多件/多件/多件/多件/多件/多件/约500件/多件/多件/多件/多件/多件/约500件/多件/多件/多件/约500件/多件/多件/多件华府转至新管终端提取病毒RNA存储于-80摄氏度供进一步处理

2.6.3动态隔离

ELISA所有阳性粪便样本都取出以隔离病毒约1克排泄物样本与9毫升无菌PBS混合并含抗生素排泄物悬浮于800rm离心机15分钟超级流体内含有冠状病毒和轮状病毒阳性通过0.45过滤华府mmbrane注射器滤波过滤器和过滤器混合成等量杜百科修改飞鹰中型体程,内含5%子科血清和10华府g/ml晶体试探并孵化于37摄氏度60分孵化后,1毫升混合注入带分单层Madin-Darby牛排细胞线并保留1小时编译病毒吸附37摄氏1小时后,细胞三次用平面DMEM维护介质冲刷,37摄氏37摄取充电₂.每日观察单层开发5天,病毒在受3轮冷解后每隔2天盲化48小时后观察到CPE,其特征是单层细胞毁损、细胞四舍五入和受感染细胞中断并分离出Flask显示特征CPE的单元格通过冷解三次离心机采集,时间为1.6万分之二20分4摄氏度消除细胞碎片装有病毒的超级目录收集并存储在-80摄氏度以备更多通道未检测到CPE,样本被视为“未检测病毒”(NVD),文化在-80摄氏度冷冻后3000分解离心机10分第三段重复使用(P3),如果48小时注射后第三段未见CPE,则样本被认为对冠状病毒和轮状病毒都为负值。

2.6.4.逆序分量链响应

CDNA合成工具使用RT-PCRKT(QIAGEN)执行,根据制造商指令确认牛冠病毒和轮状病毒A和随机求素华府L最后响应量使用表内描述的素数单筛分BCV和BRV基因组一号基于上项研究26,27号..PCR响应按制造商指令执行

优化反应混合RT-PCR为dsRNA2.5华府l,PCR缓冲区2.5华府ldNTPs2.5华府lMgC₂2.5华府l前向素数器(10pol)3.0华府l逆向入门10华府M6华府DNase/RNS免费水华府l.2.5华府i病毒dsRNA在95摄氏度减硬5分钟并立即冷冻5分钟分析PCR产品时,应用agarose凝胶电阻1.5%凝胶编译华府上百双阶梯加PCR产品以110伏特运行45分钟基因段PCR产品大小在一个凝胶文档系统中照亮并拍下照片

2.7数据管理

收集的数据输入微软Excel应急表以5%值评估粪便样本与冠状病毒和轮状病毒变量之比的差异,如使用千方位研究的动物的年龄组和性别量化数据编码并输入计算机扩展表,并使用R软件分析数据

3级结果

共收集并分析245个小牛排排水样本及其相关牛群和农场级信息,以确定埃塞俄比亚奥罗米亚中部奶牛牛科病毒和轮状病毒感染的流行程度245小牛中83头(33.88%)腹泻和162头(66.12%)采样时没有腹泻(表)。2)小牛四周内冠状病毒和轮状病毒感染总体流行率估计分别为0.4%(1/245)和2.45%(6/245),由选定奶牛农场抗菌三明治ELISA计算2)

分头计算两组小牛(即腹泻和非腹泻小牛)的结果时,在腹泻小牛中观察到1.2%(1/83)corona病毒和7.23%(6/83)roba病毒的流行率,所有非腹泻样本都为负数(0/162表表)。2)

抗原阳性样本分布与小牛群的年龄、品种和性别相对应见表2.结果表明母牛头周和第二周流行率分别为4%和0.9%,轮状病毒和冠状病毒流行率分别为0.9%。显示新出生的1-2周小牛更容易受冠状病毒和轮状病毒感染观察到牛群不同时代的冠状病毒和轮状病毒流行程度并不显著(Corona病毒和轮状病毒流行率不显著)(Corona病毒和轮状病毒流行率不显著)。 )表23)

当前研究表明,雄性比母小牛更容易受冠状病毒和轮状病毒感染高流行率1.2%(1/81) Corona病毒和6.2%(5/81)roba病毒与雄性小牛相关联,而雌性小牛的流行率分别为0%(0/163)和0.6%(1/164)。流行程度仅为雄性小牛之间的轮状病毒30分到2小时小牛进编程中观察到冠状病毒和轮状病毒Ag高发率,而小牛出产后30分到2小时小牛进编程新生牛群比本地牛群更容易受冠状病毒和轮状病毒感染流行程度非静态显赫 )和交错共生进食当前研究表明,亚的斯亚贝巴的冠状病毒流行率较高(0.8%),塞贝塔的轮状病毒感染率(4%)高于其他选定网站流行程度不显著 )相间选择位置3)

Calves楼面混凝土比Calves楼面砖块更容易受corona病毒和轮子病毒感染Corona病毒和轮子病毒流行程度不显著 )小牛楼间结果表明,6.9%小牛出生后立即从大坝分离出,发现轮状病毒阳性,而0.7%和2.6%小牛出生后24小时以上从大坝分离出小牛样本检测到corona病毒和轮状病毒(表)(分别为0.7%和2.6%(小牛出生后24小时以上从大坝分离出)(Corona病毒和轮状病毒表)。2)常用值不静态显值 )Corona病毒和轮子病毒介于小牛与大坝分离时间间3)参表2分层常用性其他变量

研究用MDBK细胞线从Ag-ELISA测试阳性样本所有样本分离病毒7个CORNA病毒样本和RVA病毒样本中,MDBK细胞线所培养的7个样本中,5个样本中检测到CPE(1个CORNA病毒样本和4个RVA病毒样本),其余2个RVA病毒样本中未检测到CPE,甚至在第三次盲目通过时也没有检测到CPE第一段受感染细胞没有显示CPE自第二段起 受感染细胞开始显示特征CPE24小时后(后感染p.i.),受感染细胞变圆阻塞时间为48小时i, 细胞薄圆形72小时前细胞变小 多数单层分离

7个阳性样本中,只有5个样本(1个冠状病毒样本和4个轮状病毒样本)由RT-PCR筛选确定分子特征,因为剩余样本中没有足够的排泄物样本由RT-PCR技术检验的5(1个corona病毒样本和4个roba病毒样本)排泄式corona病毒样本和roba病毒样本中,所有样本都确认为RT-PCR测试阳性(100%)。

4级讨论

新生小牛是全世界畜牧养殖的重要源头,即替换储存28码..行业面临许多疾病问题,如小牛腹泻,通常会对其产生极大影响。卡尔夫腹泻是一种初级疾病,影响新生小牛,导致新生小牛发病和死亡,并因治疗成本、诊断成本、体重下降或受感染动物死亡以及生长不良而造成经济损失小牛关键段是出生后头几天在发展中国家如埃塞俄比亚,家畜是贫困家庭的主要收入来源。这些家庭因新生儿幼崽死亡诅咒而遭受严重痛苦多病毒、细菌和寄生物代理物中,牛冠病毒和轮子病毒是家畜新生儿腹泻的首要原因新生儿死亡原因与牛冠病毒和轮状病毒具体相关29..异形污染在传染冠状病毒和轮状病毒感染中起着重要作用,而感染在全球牛群中十分普遍。快速诊断疾病对有效控制措施很重要30码..

245样本中的1(2.4%)和245样本中的6(2.4%)使用Ag-ELISA筛检阳性非腹泻样本均呈负数(0/162)。

83个腹泻样本中,ELISA发现1(1.2%)对冠状病毒呈阳性其他一些研究还显示,新生儿小牛腹泻中冠状病毒的流行率略低于轮状病毒的流行率。文献少说埃塞俄比亚的 Corona病毒流行状态本研究与Dash等人的报告一致[31号.印度.4.76%多数其他报告与当前研究不相容

在当前研究中,腹部小牛发现轮状病毒流行率为7.23%(6/83)。与Pérez等人报告的结果一致[32码哥斯大黎加(7%),Yilmaz三十三在土耳其(8.92%)和Rajendran和Kang34号在印度(5.5%)包括亚伯拉罕等人在内的许多国家的作者报告轮子病毒流行率较高[19号Expertiations(16.7%),Ammar等[23号阿尔及利亚14.63%)Kyle35码] in Vietnam (15%), Pisanelli et al.[36号南意大利省(16.8%),Jindal等[37号和Uhde等[18号.瑞士(58.7%)对比Fiedler等报告的结果更高[38号ordenburg省理工学院理工学院理工学院理工学院理工学院理工学院理工学院理工学院理工学院理工学院理工学院理工学院理工学院理工学院理工学院理工学院理工学院理工学院理工结果差异可归结为时间差和样本大小差转轴感染流行率视所研究的国家和地区而异28码,三十九..6轮子病毒阳性样本都来自4周以下小牛Sharma记录类似结果40码公牛小牛

当前结果可能显示雄性小牛(6.2%)比雌性小牛(0.6%)极易受轮状病毒感染Dash等人的其他研究[31号和夏尔马40码并报告雄牛牛群敏感度较高(20.37%和42.85%),而雌牛群敏感度分别为12.76%和28.2%。可能的理由可能出自Odde的免疫系统41号与雄性小牛相比,雄性小牛高抗龙病毒IgG浓度这可能是管理实践的结果,像大多数奶牛农场一样,母牛比雄牛更能照顾前情提要[23号和Dash等[31号并报告雄牛小牛比母牛更容易预防轮状病毒感染同理,其他人注意到,雄性小牛比母小牛更容易腹泻。

适龄小牛易感性^st周内2^后端周内轮状病毒感染比小牛大粪便小牛样本中出现轮状病毒,发现随着小牛年龄增高而下降本研究的调查结果与亚伯拉罕等人报告的前工一致[19号万事通高发轮发病毒腹泻小牛主要限制在生命前2周5-21天小牛中观察到最大流行轮状病毒腹泻28码..两周大的小牛最易受轮状病毒感染,这可能是由于被动免疫度下降和自然抗感染性缺失所致。3周大的小牛特征是没有轮子病毒增强自然抗感染[23号..

结果表明,塞贝塔(4%)比比绍福图(3.3%)和亚的斯亚贝巴(2.4%)略高点这可能归结于采样面积和近农场中多工厂的存在,这些工厂可能成为动物污染源在当前研究中,交叉小牛(4.2%)比本地小牛(2.8%)记录得更多,这与Sharma前一份报告相似[42号..

在这次研究中,细胞文化病毒增长通过CPE测试注入细胞评估7个样本中只有5个样本(1个冠状病毒样本和4个轮状病毒样本)Ag-ELISA阳性样本确定MDBK细胞受感染,由生成二通道特征CPE确定并持续到第三通道CPE观测特征为四舍五入、支队并摧毁单层单元研究中生成的CPE与前几份报告一致[43号..

RT-PCR技术确认粪便样本中存在corona病毒和轮子病毒,这些样本先前由ELISA诊断并生长细胞文化RT-PCR基因组法被进一步确认为实用流行病学工具,并使用排泄物样本中每个病毒区域专用通用素量测定corona病毒和轮子病毒核酸的存在44号..

5级结论和建议

本次调查旨在调查奥罗米亚中部不同选择农场小牛群中冠状病毒和轮状病毒的流行性、隔离性及特征描述并研究牛群年龄、性别、品种和住宅底层对腹泻流行的影响使用Ag-ELISA发现7个样本(1个corona病毒和6个轮子病毒)呈阳性,所有分离器均取自1小牛腹泻^st和2^后端几周大结果表明轮流病毒检测与小牛性关联,雄性小牛的轮流病毒流行率比母小牛高。此外,混凝土楼小牛群的流行程度更高,晚进联想(2小时内)以及本地bred小牛群和出生后立即从大坝分离的小牛群

观察研究和问卷调查还显示,不仅认识共生菌喂养的好处已足够,而且对新子宫共生调用时间对最终开发抗病原体包括冠状病毒和轮状病毒感染的免疫状态至关重要。加尔文格区应拥有深沟草场或从谷仓区可见草场,并选取或划入积分区以允许适当排水肠道疾病如corona病毒和轮子病毒感染是一个关键的健康问题,小牛中断生产效益,减肥增生,提高死亡率,病毒传播潜力动物学,确定疾病负担和负责任的风险因素势在必行。这对于实施有效预防措施非常有用,如对新生小牛进行早期共生喂养、大坝防疫和改善牲畜管理

基于上述结论,提出了以下建议:i)提高研究人员和政府对corona病毒和轮子病毒感染对小牛健康和生长性能及国民经济的影响的认识非常重要二)需要进一步研究小牛群中冠状病毒和轮状病毒感染问题,覆盖该国大片地区,以便生成并理解循环菌株的代表性信息提供这类数据对控制该疾病至关重要。

缩写

Ag:	抗原
Ag-ELISA:	反捕捉酶关联免疫感应测试
BCOV:	波文corona病毒
BROV:	波文轮播病毒
CDNA:	补充式脱氧核糖核酸
CPE:	脉冲效果
DEM:	杜尔贝科修改飞鹰中型
脱氧核糖核酸	二氧核素酸
DNTPs:	双核酸三磷酸
sRNA:	双排RNA
ELISA:	神经联动免疫感应测试
MDBK:	Madin-Darby牛肾
mRNA:	送信者RNA
NAHDIC:	国家动物健康诊断调查中心
NSP:	非结构性蛋白
NVD:	无病毒检测
OD:	光密度
P.i:	后感染
PBS:	磷缓冲盐碱
PCR:	聚合物链响应
PH:	氢电源
RNA:	核酸
rpm:	革命分钟
RT-PCR:	逆转转录入聚合数链响应
SHFDO:	Sebeta Hawas财经开发局
UK:	英国
VP:	结构蛋白质

数据可用性

支持本研究发现的数据可应请求从相关作者处获取。

道德验证

亚的斯亚贝巴大学兽医学院动物研究伦理和评审委员会对这项研究的道德核准

协议

农场管理员还同意取牛样本并进一步研究采样使用

利益冲突

作者声明他们没有利益冲突

作者贡献

美国帮助构思研究思想、设计资料收集、数据分析、数据判读和手稿写编辑FD为研究概念、数据判读和手稿编辑或评审作出了贡献MA帮助构思研究思想AT为数据分析、数据判读和手稿写编辑提供素材所有作者阅读并批准最终手稿

感知感知

作者想感谢他们的顾问Dr.富法道夫博士Asamino Tesfaye全程全程投入教程、学术引导和持续鼓励作者最深切地感谢Dr.富法道夫为研究提供道义和财政支持这项研究工作由农学院、Oda Bultum大学、亚的斯亚贝巴大学兽医医学院和Sebeta作者衷心感谢国家动物健康诊断调查中心实验室SebetaDereje Shegu、Chala Guyassa和Melaku Sombo等方方面面的积极合作,特别是在实验室工作方面。